Xét nghiệm máu cho virus Epstein-Barr cho kháng thể và PCR: làm thế nào để lấy nó,

Bằng cách chải mụn rộp, chúng ta thường được sử dụng để hiểu những vết thương đau không thương tiếc trên mặt trong vùng môi, sau đó hình thành lớp vỏ màu nâu. Than ôi, đây chỉ là một trong những khuôn mặt của vi rút herpes, mà một người có thể đáp ứng trong 8 hypostases. Những gì chúng ta thường gọi là mụn rộp là một loại virut loại 1, hoặc một loại virut gây ra chứng herpes simplex. Loại virut thứ hai gây ra chứng mụn rộp sinh dục, loại thứ ba - "thủy đậu" và bệnh zona, bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm khuẩn thứ 4 và một số bệnh lý nguy hiểm khác ... Danh sách này có thể được tiếp tục, nhưng chúng tôi sẽ tập trung vào loại virus herpesvirus loại 4, được gọi là virus Epstein-Barr. Chúng ta hãy thử tìm ra virut loại virut gây bệnh herpesvirus loại 4, điều gì nguy hiểm, khi nào và tại sao họ tiến hành phân tích virus Epstein-Barr và những kết quả của các nghiên cứu trong phòng thí nghiệm nói gì.

Loại virut gây bệnh herpes loại 4 là gì?

Herpesvirus type 4, là một trong những loại nhiễm trùng do herpesvirus, được mô tả cách đây 53 năm bởi nhà virus học người Anh Michael Epstein. Trong công trình của dự án, giáo sư được trợ giúp bởi sinh viên tốt nghiệp Yvonne Barr. Đối với những người này, vi rút này có tên của nó. Tuy nhiên, đã 15 năm sau khi làm quen với virus, tên khoa học của ông đã được đổi thành virus herpesvirus 4 của con người, và một năm trước, loại virut này được gọi là virut gamma loại 4.

Nhưng virus Epstein-Barr là gì? Giống như bất kỳ virút nào khác, virion (virut đồng hồ) của herpesvirus type 4 bao gồm một vật liệu di truyền (trong trường hợp này là một DNA kép) và lớp protein xung quanh (capsid). Hơn nữa, vi rút được bao quanh bởi một màng giúp nó dễ dàng phù hợp với bên trong các tế bào chủ.

Bất kỳ loại virus nào không phải là dạng tế bào mà là một yếu tố gây nhiễm và không thể phát triển và nhân rộng ra bên ngoài các tế bào của một sinh vật sống. Môi trường sống ưa thích của herpesvirus type 4 là các tế bào biểu mô của vòm họng. Họ cũng không coi thường bạch cầu, thích một trong những giống của họ, được gọi là lympho B. Đó là các tế bào B tích cực tham gia vào hệ thống miễn dịch của cơ thể. Khi tiếp xúc với kháng nguyên, trong trường hợp của chúng tôi là virus herpesvirus loại 4 (chính xác hơn, các kháng nguyên của nó), các tế bào lympho B sản xuất kháng thể (protein-globulin miễn dịch). Đó là họ có thể được phát hiện trong máu của bệnh nhân bằng cách phân tích virus Epstein-Barr (VEB).

Loại thứ tư của herpesvirus cô lập 4 kháng nguyên, xuất hiện trong một trình tự nhất định:

• EA là một kháng nguyên sớm xuất hiện ở giai đoạn ban đầu của bệnh, khi các hạt virus ở giai đoạn tổng hợp (nhiễm trùng cấp tính sơ cấp hoặc tái hoạt động của virus lẩn tránh với miễn dịch miễn dịch)
• VCA là một kháng nguyên capsid, được chứa trong lớp protein và cũng thuộc sớm, bởi vì lâm sàng bệnh trong giai đoạn này thậm chí không thể tự biểu hiện,
• MA - màng kháng nguyên, xuất hiện khi virion đã được hình thành,
• EBNA - Một kháng nguyên hạt nhân (polypeptide hoặc hạt nhân) là một trong những kháng nguyên muộn, các kháng thể có thể được phát hiện ngay cả vài tháng sau khi bệnh và vẫn còn trong máu suốt cuộc đời.

Herpesvirus type 4 rất khôn lanh. Vì virus không hoạt động bên ngoài cơ thể sống nên nó chỉ có thể bị nhiễm bệnh từ người là nguồn lây nhiễm. Và nó không phải là tất cả các triệu chứng của bệnh được phát hiện ra, nhiễm trùng có thể có một hình thức bị xoá, cải trang như mệt mỏi thông thường. Ví dụ, hội chứng mệt mỏi mạn tính là trong hầu hết các trường hợp liên quan đến vi-rút Epstein-Barr.

Các virion cá thể có thể được tìm thấy trong máu, nước bọt, tinh dịch, tiết chất âm đạo, các mô của các cơ quan khác nhau. Hạt của virus, cùng với nước bọt và máu, không thể đến được các vật xung quanh chúng ta, nơi chúng sẽ ở trong trạng thái không hoạt động, cho đến khi nào đó chúng xâm nhập vào cơ thể con người. Trong phần lớn các trường hợp, nhiễm trùng xảy ra bởi không khí hoặc tiếp xúc (qua nụ hôn) qua. Tuy nhiên, lây truyền virut từ mẹ sang thai cũng có thể xảy ra, nhiễm trùng trong khi truyền máu (nếu máu của người hiến có virion virion) trong quá trình quan hệ tình dục.

Sau khi xâm nhập vào cơ thể và cấy ghép vào cấu trúc tế bào, có thể mất từ 5 đến 50 ngày trước khi bệnh tự nhắc nhở. Nhưng nó có thể không nhớ, rò rỉ trong một hình thức ẩn, như nó xảy ra trong nhiều trường hợp.

Có, theo các nghiên cứu, khoảng 90% người lớn ít nhất một lần trong đời họ bị bệnh herpetic liên quan đến VEB. Hầu hết mọi người thậm chí không biết, bởi vì cơ thể của họ đã có thể đối phó với các cuộc tấn công của virus. Nhưng điều này không phải lúc nào cũng xảy ra.

Vi rút Epstein-Barr tự biểu hiện như thế nào?

Thông thường, các bác sĩ phải đối mặt với thực tế của họ với các loại sau đây của khóa học của herpesviral nhiễm 4 loại:

• Hình dạng mãn tính (xảy ra sau giai đoạn cấp tính của bệnh, có một số triệu chứng chung của sức khoẻ yếu),
• Hình thức tiềm ẩn hoặc tiềm ẩn (không có triệu chứng, nhưng virus vẫn hoạt động và được giải phóng vào môi trường),
• Hình thức chậm (xảy ra ít thường xuyên, các triệu chứng xuất hiện một lần trong một thời gian dài, kết thúc với cái chết của bệnh nhân).

Lần đầu tiên một người bị nhiễm virut Epstein-Barr chủ yếu ở trẻ em và thanh thiếu niên. Tỉ lệ đỉnh cao rơi vào độ tuổi 14-18.

Nhiễm virut nguyên phát có 3 dạng khác nhau:

• không triệu chứng (không biểu hiện lâm sàng),
• Hô hấp (các triệu chứng nhiễm trùng đường hô hấp: sốt, chảy nước mũi, suy yếu nói chung, vv)
• mononucleosis truyền nhiễm với một bộ ba các triệu chứng chính: sốt cao, dấu hiệu đau họng với lớp vỏ màu vàng trên tonsils, tăng các cơ quan như gan và lá lách; với sự gia tăng mức bạch cầu và sự gia tăng các hạch bạch huyết.

Có một số lựa chọn để thoát khỏi giai đoạn cấp tính của bệnh:

• hồi phục hoàn toàn,
• các triệu chứng của bệnh biến mất, nhưng virus vẫn còn trong cơ thể và phát triển, mặc dù nó không dẫn đến bất kỳ sự thay đổi đáng chú ý nào trong tế bào (virus carrier)
• không có triệu chứng của bệnh, virus không rời khỏi cơ thể, nhưng cũng cho thấy hoạt động đặc biệt (hình thức tiềm ẩn),
• kích hoạt lại (kích hoạt lại) virut từ dạng tiềm ẩn,
• nhiễm trùng mãn tính (tái phát của bệnh, hình thức hoạt động mãn tính, tổng quát với các tổn thương của cơ quan và hệ thống cơ thể).

Kết quả của sự tồn tại lâu dài của một vi-rút trong một cơ thể có thể trở thành:

• Biểu hiện mãn tính của mononucleosis truyền nhiễm.
• hội chứng Gematofagotsitarny : sốt ổn định, giảm các thành phần máu (tăng đông máu), gan to và lá lách, chảy máu niêm mạc, vàng da (do rối loạn gan), hạch to, các triệu chứng thần kinh.
• Vết sẹo có sự phát triển của suy giảm miễn dịch thứ phát : tăng nhiệt độ trong một thời gian dài, suy nhược chung, tăng và đau nhức các hạch bạch huyết, đau cơ và khớp, các bệnh truyền nhiễm thường xuyên.
• Sự phát triển các bệnh lý tự miễn dịch ở dạng lupus đỏ, viêm khớp dạng thấp, vân vân
• Các biểu hiện của hội chứng mệt mỏi mạn tính với sự xấu đi của sức khoẻ nói chung và khả năng làm việc.
• Một dạng nhiễm trùng mãn tính với CNS, tim cơ tim, thận, gan, bệnh phổi.
• Sự phát triển của ung thư (bạch cầu bạch cầu và lymphoma), trong đó có một sự gia tăng bệnh lý về số lượng các tế bào của hệ bạch huyết. Loại virut gây bệnh herpesvirus loại 4 không phá huỷ các tế bào vận chuyển, nhưng buộc họ nhân lên tích cực, do đó phát hiện ra sự phát triển mới từ mô lymphoid được phát hiện.

Như bạn thấy, virus Epstein-Barr không phải là vô hại như nó có vẻ như trong nháy mắt đầu tiên, và do đó, nó không phải là giá trị nó được điều trị nhẹ. Đặc biệt là kể từ khi herpesvirus type 4 được đặc trưng bởi các đợt truyền nhiễm thường xuyên và hình thức tiềm ẩn, không kể đến các dạng nhiễm trùng mãn tính khác, khi một người vẫn là nguồn lây nhiễm mà không biết.

Xác định sự hiện diện của một tác nhân gây bệnh trong cơ thể trong trường hợp này là có thể chỉ với sự giúp đỡ của một phân tích đặc biệt của virus Epstein-Barr, vật liệu sinh học mà máu thường phục vụ.

Chỉ định cho thủ tục phân tích virus Epstein-Barr

Kể từ khi nhiễm virus herpesvirus loại 4 đôi khi không dễ dàng để xác định, nghi ngờ nó không phải luôn luôn rơi. Nhưng có những dấu hiệu nhất định mà bác sĩ có thể nghi ngờ sự có mặt của siêu vi trong cơ thể:

• một hệ thống miễn dịch suy yếu nặng (ở nhóm có nguy cơ cao có bệnh nhân nhiễm HIV và AIDS, bệnh nhân sau ghép tạng hoặc hóa trị),
• sự gia tăng các hạch bạch huyết khu vực ở cằm và phần chẩm của đầu và sự đau đớn của họ, đặc biệt là nếu điều này được quan sát thấy sau khi truyền máu hoặc ghép tạng từ người hiến tặng.
• nhiễm trùng đường hô hấp cấp (ARVI), diễn ra trên nền nhiệt độ rất cao (38-40 độ),
• sự xuất hiện của các dấu hiệu nhiễm mononucleosis truyền nhiễm, thường xảy ra dưới ảnh hưởng của virus Epstein-Barr.

Ngay cả khi những dấu hiệu trên không hiện diện trong một người, sự nghi ngờ của một chuyên gia có thể gây ra một số kết quả xét nghiệm thông thường (phân tích tổng quát và hóa sinh máu), cũng như các nghiên cứu về tình trạng miễn dịch.

Một xét nghiệm máu chung cho vi rút Epstein-Barr có thể cho thấy:

• sự gia tăng số lympho bào,
• hemoglobin thấp, cho thấy sự giảm mức hồng cầu,
• tăng tính coagulability máu do một số lượng lớn các tiểu cầu,
• sự xuất hiện của virotsitov (các tế bào lympho không điển hình, tương tự cấu trúc với các monocytes).

Xét nghiệm máu sinh hóa cung cấp thông tin về trạng thái của các cơ quan nội tạng sẽ cho thấy sự thay đổi trong chức năng của gan và lá lách.

Xét nghiệm miễn dịch với EBV có thể hiển thị những thay đổi về số lượng các tế bào lympho cụ thể, sự chênh lệch về số lượng các lớp khác nhau immunoglobulin (disimmunoglobulinemiya), thiếu immunoglobulin G, trong đó cho thấy sự yếu kém của hệ thống miễn dịch và sự bất lực của mình để chịu được sự tấn công của virus.

Những kết quả như vậy của các phân tích không đặc hiệu có thể báo động các bác sĩ, nhưng để nói chính xác những gì họ đang xử lý là chưa thể. Tất cả sẽ vẫn ở giai đoạn giả định và chẩn đoán sơ bộ. Trong hầu hết các trường hợp, các bác sĩ nghi ngờ một dạng tiềm ẩn của mononucleosis truyền nhiễm, mặc dù các bệnh lý về virut khác (cúm, viêm gan, vv) cũng có thể biểu hiện theo cùng một cách.

Liên quan đến tỷ lệ mắc bệnh viêm gan loại 4 cao và khả năng lây truyền từ mẹ sang con, phân tích virus Epstein-Barr sẽ có ích trong việc lên kế hoạch mang thai. Nếu người mẹ đã từng bị nhiễm trùng trước đó, cơ thể của cô ấy đã phát triển kháng thể với cô ấy. Nhiễm trùng lặp lại thường bị loại trừ do sự hình thành miễn dịch liên tục, và nếu có, nó sẽ không có những hậu quả có thể xảy ra khi gặp phải virus đầu tiên. Miễn dịch sẽ ức chế hoạt động của virus trong suốt cuộc đời, mặc dù bản thân virut sẽ vẫn bên trong cơ thể, giống như bất kỳ virut gây bệnh herpes nào.

Nếu người mẹ trong tương lai nhặt virut mụn cóc trong thời kỳ mang thai, nó sẽ bị sẩy thai và sinh non, hoặc vi rút sẽ ảnh hưởng tiêu cực đến sự phát triển của tử cung.

Phân tích về VEB có thể được chỉ định bởi nhà ung thư học với nghi ngờ Burkette lymphoma hoặc chẩn đoán các quy trình khối u ở những người có HIV. Nhà trị liệu có thể sử dụng phân tích như vậy trong chẩn đoán nhiễm trùng herpetic (chẩn đoán phân biệt để làm rõ loại virus). Đôi khi phân tích cũng được thực hiện để đánh giá hiệu quả của điều trị.

[1], [2], [3], [4], [5], [6], [7], [8], [9], [10], [11], [12], [13]

Chuẩn bị

Tùy thuộc vào loại nghiên cứu vật liệu sinh học cho nó có thể là máu, nước bọt, nước tiểu, đờm, mẫu nước ối, cạo, mà được lấy từ cổ tử cung hoặc niệu đạo, dịch não tủy (CSF). Thông thường nhất, các bác sĩ sử dụng nghiên cứu máu, được coi là thông tin nhất.

Rõ ràng là một số điểm có thể ảnh hưởng xấu đến chất lượng và số lượng của vật liệu sinh học, vì vậy một ngày trước khi nó là cần thiết để tuân thủ các quy tắc nhất định:

• Bất kỳ xét nghiệm nào (nhất là xét nghiệm máu) nên được thực hiện vào buổi sáng khi bụng đói. Bữa ăn cuối cùng không được chậm hơn 12 giờ trước khi uống máu, vì vậy tốt hơn là nên uống nước cho bữa tối.
• Máu tĩnh mạch được xem là vật liệu thích hợp nhất để phân tích vi rút Epstein Barr, và phần còn lại là 15 phút luôn được khuyến cáo trước khi cho máu từ tĩnh mạch nếu một người vừa mới đến phòng thí nghiệm,
• Để lấy máu mà không có bất kỳ hậu quả nào và kết quả phân tích đáng tin cậy thì không nên tập thể dục tích cực và chơi thể thao, uống rượu và hút thuốc trong 12 giờ trước khi làm thủ thuật.
• Kết quả của các xét nghiệm có thể ảnh hưởng đến việc uống thuốc. Từ thuốc phải được bỏ rơi ít nhất 2 ngày trước khi phân tích. Nếu không thể làm được điều này, cần thông báo cho y tá phòng thí nghiệm về các chế phẩm đã được tiến hành.
•  Vào thời kỳ mang thai trước khi nghiên cứu VEB, việc phân tích phân tử toxoplasmosis được thực hiện để loại trừ phản ứng dương tính giả.
• Nếu xét nghiệm máu cho vi rút Epstein-Barr được thực hiện cho trẻ dưới 5 tuổi, nửa giờ trước khi thao tác, bé cần được cho nhiều nước đun sôi trong những phần tương đối nhỏ.

Nếu một vật liệu sinh học khác được lấy để phân tích, bác sĩ nên xác định trước tất cả các sắc thái chuẩn bị để phân tích, tùy thuộc vào vật liệu được sử dụng.

[14], [15], [16], [17], [18], [19]

Kỹ thuật phân tích virus Epstein-Barr

Vai trò quan trọng trong việc chẩn đoán bệnh herpes loại 4 và nhiễm mononucleosis truyền nhiễm được đưa ra cho các bác sĩ bằng các xét nghiệm đặc hiệu giúp xác định DNA của virus hoặc các kháng thể duy nhất trong vật liệu sinh học của bệnh nhân. Các loại chính của các nghiên cứu trong phòng thí nghiệm được sử dụng để phát hiện vi-rút Epstein-Barr trong cơ thể người bao gồm xét nghiệm miễn dịch enzyme (ELISA) và chẩn đoán PRC. Hãy để chúng tôi xem xét chi tiết hơn bản chất của cả hai phương pháp và đặc thù của hành vi của họ.

Phân tích miễn dịch học trên VEB

ELISA là một nghiên cứu (phân tích) của máu tĩnh mạch của bệnh nhân về kháng thể đối với virus Epstein-Barr. Theo kết quả chẩn đoán trong máu của bệnh nhân với EBV phát hiện loài globulin miễn dịch IgG hoặc IgM (tất cả 5vidov họ) đến một trong ba kháng nguyên (sớm, hoặc capsid hạt nhân).

Phân tích được thực hiện trong phòng thí nghiệm miễn dịch, nơi bệnh nhân lấy khoảng 10ml máu từ tĩnh mạch. Tiếp theo, vật liệu sinh học được để ở nhiệt độ phòng trong một phần tư giờ, trong đó máu nếp gấp. Các cục máu đông được tách ra một cách gọn gàng từ phần chất lỏng. Chất lỏng được ly tâm và lấy huyết thanh (huyết thanh) trong máu. Đó là cô ấy đang được nghiên cứu thêm.

Ý tưởng về phương pháp phát sinh trên cơ sở dữ liệu trong các kháng thể cụ thể của cơ thể được tạo ra cho mỗi loại virus và vi khuẩn xâm nhập cơ thể từ bên ngoài. Các sinh vật nhận ra người ngoài hành tinh trong chúng và tiêu diệt chúng với sự trợ giúp của các kháng thể duy nhất gắn chặt với kháng nguyên.

Bản chất của phân tích ELISA dựa chính xác vào phản ứng này. Các kháng thể gắn nhãn được kết hợp với kháng nguyên. Nhãn được áp dụng cho một chất phản ứng với một enzyme đặc biệt để thay đổi màu sắc của mẫu. Càng nhiều "chuỗi" như vậy, càng có nhiều màu sắc của vật liệu sinh học.

Phân tích miễn dịch có thể được thực hiện theo ba cách:

• Trực tiếp IFA. Chất lỏng thử nghiệm được đặt trong giếng và để lại trong khoảng nửa giờ để các kháng nguyên có thể gắn vào thành của giếng. Để các kháng nguyên bị hấp thụ được thêm một chất lỏng với các kháng thể dán nhãn. Sau thời gian cần thiết (từ nửa giờ đến 5 giờ), khi các kháng thể được phát hiện và tiếp xúc với kháng nguyên, chất lỏng được thoát nước, giếng được rửa nhẹ nhàng và enzym được thêm vào. Bằng phương pháp sắc tố, nồng độ của virus trong một đơn vị máu được xác định.
• EIA gián tiếp. Trong phương pháp này, huyết thanh của máu và các kháng thể gắn nhãn được thêm vào các kháng nguyên bị sói trên bề mặt của giếng. Kết quả là, có 2 loại dây chằng, một số trong đó thu được nhãn. Kết quả phụ thuộc vào nồng độ kháng nguyên trong mẫu thử. Các kháng thể không gắn nhãn hơn, ít hợp chất được gắn nhãn với enzyme.

Hơn nữa, một chất phản ứng đặc biệt được thêm vào chế phẩm được rửa sạch, theo đó hoạt động enzyme của phức hợp kháng nguyên kháng thể được xác định.

• "Sandwich". Nó khác với phương pháp gián tiếp trong đó kháng nguyên ban đầu, chứ không phải là kháng thể, được sorbed trên bề mặt. Đối với họ, một giải pháp chứa các kháng nguyên được nghiên cứu được thêm vào. Sau khi rửa xe mang, thêm kháng thể với nhãn enzym. Sự dư thừa của các kháng thể được loại bỏ lại và một chất màu được thu được sử dụng hydrogen peroxide, được nghiên cứu bằng phương pháp quang phổ.

Loại phân tích này cho phép không chỉ xác định các kháng thể cụ thể và xác định nồng độ kháng nguyên mà còn làm rõ giai đoạn của bệnh. Vấn đề là các kháng nguyên khác nhau của vi rút của virus Enstein-Barr xuất hiện ở các giai đoạn khác nhau của nhiễm herpetic, và do đó các kháng thể đối với chúng được sản xuất trong một thời gian nhất định của bệnh.

Do đó, IgG kháng thể kháng nguyên sớm (IgG EA) xuất hiện trong máu 1-2 tuần sau khi nhiễm trùng, khi bệnh ở giai đoạn cấp tính hoặc giai đoạn tái hoạt động của virut. Loại bỏ globulin miễn dịch loại này trong vòng 3-6 tháng. Trong giai đoạn mãn tính của nhiễm virut, các kháng thể này đặc biệt rất nhiều, và ở dạng không bình thường chúng đều vắng mặt.

Các kháng thể IgG đối với kháng nguyên capsid (IgG VCA) cũng xuất hiện sớm, trong suốt 4 tuần đầu của bệnh, nhưng phần lớn được xác định bởi tháng thứ hai của nhiễm trùng. Trong giai đoạn cấp tính, chúng được tìm thấy ở hầu hết các bệnh nhân, nhưng chúng có thể không xuất hiện ở trẻ em. Trong giai đoạn mãn tính của bệnh, đặc biệt là trong thời kỳ kích hoạt lại của virut, lượng IgG VCA đặc biệt cao. Những kháng thể này trong một người trong máu vẫn tồn tại mãi mãi, giống như bản thân virus, cho thấy sự miễn dịch hình thành đối với tác nhân gây bệnh.

Các kháng thể của IgM với kháng nguyên capsid (IgM VCA) có thể xuất hiện ngay cả trước khi những dấu hiệu đầu tiên của bệnh xuất hiện. Nồng độ của chúng đặc biệt cao trong 6 tuần đầu của bệnh. Loại kháng thể này là đặc tính của nhiễm trùng cấp tính và kích hoạt lại mãn tính. IgM VCA biến mất sau 1-6 tháng.

IgG kháng thể đối với một gen hạt nhân (IgG EBNA) có thể chỉ ra rằng một người trước đây đã trực tiếp gặp phải một bệnh nhiễm herpetic. Trong giai đoạn cấp tính của bệnh, chúng rất hiếm, thường xuất hiện trong giai đoạn phục hồi (3-10 tháng). Trong máu của họ, chúng có thể được tìm thấy vài năm sau khi bị nhiễm trùng.

Việc xác định các kháng nguyên đơn lẻ không đưa ra được một bức tranh hoàn chỉnh về bệnh, do đó nên kiểm tra các kháng thể khác nhau kết hợp. Ví dụ, nếu chỉ có IgM VCA và IgG EBNA không được phát hiện, nó là một nhiễm trùng cơ bản.

Than ôi, để xác định nhiễm trùng herpetic ban đầu hoặc bệnh lý bẩm sinh của xét nghiệm miễn dịch enzyme thường không đủ. Trong trường hợp thứ hai, các kháng thể không thể được phát hiện ở tất cả. Là một xét nghiệm xác nhận trong bệnh sơ cấp, một nghiên cứu phân tử máu hoặc các vật liệu sinh học khác trên vi rút Epstein-Barr được sử dụng.

Phân tích PRC cho virus Epstein-Barr

Phân tích này được thực hiện ở giai đoạn nhiễm trùng cấp tính cấp tính, nếu không kết quả sẽ không chính xác.

Bản chất của phương pháp PRC (phản ứng dây chuyền đa chiều) bắt nguồn từ thực tế là mỗi tác nhân gây bệnh có bộ gene riêng được đóng gói trong một phân tử DNA. DNA của mầm bệnh được chứa trong một lượng nhỏ để nghiên cứu vật liệu sinh học (vi rút có kích thước vi mô) nên rất khó để đánh giá tình hình. Nhưng nếu bạn thực hiện một phản ứng cụ thể, lượng vật liệu di truyền sẽ tăng lên đáng kể, tạo ra cơ hội để đặt tên cho tác nhân gây bệnh bằng tên.

Với sự giúp đỡ của các thiết bị dùng một lần lấy tài liệu cho nghiên cứu phân tử, được đặt trong một thiết bị đặc biệt để phân tích. Thiết bị này là bộ điều chỉnh nhiệt với một chương trình đặc biệt - một máy gia nhiệt hoặc máy khuếch đại. Trong bộ máy, chu kỳ đầy đủ của Trung Quốc (khoảng 2-3 phút) được cuộn vài chục lần, có 3 giai đoạn:

• Denaturation (ở nhiệt độ 95 độ, chuỗi DNA ngắt kết nối).
• Làm nóng (ở nhiệt độ 75 độ, hạt giống đặc biệt được chuẩn bị cho VEB được đưa vào vật liệu thử, gắn với DNA của virut).
• Sự kéo dài hoặc sinh sản của vật liệu di truyền (một enzyme đặc biệt gắn liền với hạt ở nhiệt độ 72 độ, tạo ra chuỗi DNA mới, do đó làm tăng lượng vật liệu di truyền một nửa).

Nếu chu trình hoàn chỉnh của phản ứng đa chiều đã hết 50 lần, lượng vật liệu sẽ tăng gấp 100 lần. Vì vậy, nó sẽ được dễ dàng hơn nhiều để xác định các mầm bệnh.

Phân tích virus Epstein-Barr ở trẻ

Như chúng ta đã biết, virus Epstein-Barr có thể gây ra nhiều bệnh tật. Một khi trong cơ thể con người, ông vẫn là cư dân thường trú của mình, và chỉ có công việc phối hợp tốt của hệ thống miễn dịch không cho phép ông chủ động ký sinh trùng bên trong tế bào.

Gần 95% dân số trưởng thành của hành tinh sống cùng với VEB bên trong, và phần lớn trong số họ đã gặp virut kể từ thời thơ ấu. Đối với một số ông thừa hưởng từ mẹ, và những người khác có virus từ cha mẹ và người thân đổ xô cho đứa trẻ với nụ hôn của họ, hoặc bằng những giọt trong nhà trẻ hoặc trường học (các bệnh truyền nhiễm có thường mua "phổ quát" quy mô).

Trẻ nhỏ nói chung có khuynh hướng kéo miệng, và có nhiều virion được tìm thấy trong nước bọt. Và nếu trong vườn một và một đồ chơi bị liếm bởi nhiều trẻ em, trong khi các nhà giáo dục đang bận rộn với công việc của họ, thì không có gì đáng ngạc nhiên khi virut tích cực lây lan trong các nhóm trẻ lớn.

VEB có thể dễ dàng bị gọi là bệnh của trẻ em và thanh thiếu niên, bởi vì ở tuổi vị thành niên, đã có một nửa số trẻ em bị nhiễm virut trong cơ thể (và đến 30 tuổi và khoảng 90% người lớn). Trẻ em bị bệnh ở các giai đoạn tuổi khác nhau theo cách riêng của họ. Cho đến một năm, cho đến khi đứa trẻ chủ động giao tiếp với mọi người, xác suất bị bệnh từ người đó không cao. Đứa trẻ lớn hơn một năm, ngay cả khi không đi học mẫu giáo, trở nên hòa đồng hơn, chơi đùa với các đồng nghiệp trên đường phố, cam kết mua sắm tích cực với mẹ, v.v ... Và xác suất bắt virut trở nên cao hơn nhiều.

Nhưng đây không phải là một cái cớ để khóa đứa trẻ trong 4 bức tường. Ở tuổi 1-3 năm, bệnh ở phần lớn các trường hợp xảy ra mà không có bất kỳ triệu chứng, ngoại trừ với sự gia tăng nhẹ và viêm mũi nhẹ, nhắc nhở cảm lạnh. Nó chỉ ra rằng sớm hơn một đứa trẻ được làm quen với một virus, thì dễ dàng hơn là làm quen với nó.

Nó không phải là tốt nếu đứa trẻ bị ốm mà không có sự xuất hiện của máu kháng thể IgG VCA, mà có thể chỉ ra rằng khả năng miễn dịch với virus không được thành lập, và kích hoạt có thể của virus ngay khi hệ thống miễn dịch cho lên slack. Lý do là, rất có thể, sự không hoàn hảo của hệ miễn dịch của trẻ nhỏ, đang trong giai đoạn hình thành trong nhiều năm.

Cuộc sống ở trường còn cho thêm nhiều điều kiện tiên quyết cho căn bệnh này, đặc biệt là ở giai đoạn thanh thiếu niên, khi những người trẻ tuổi chủ động thực hành hôn. Nhưng ở trẻ em trên 3 tuổi, bệnh này ít có khả năng điều trị triệu chứng. Trong hầu hết các trường hợp, bác sĩ phải đối mặt với mononucleosis lây nhiễm với các triệu chứng điển hình của nó.

Mặc dù thực tế là bệnh học có thể kéo dài (khoảng 2 tháng), nhưng nó không phải là nguy hiểm và không cần sử dụng các loại thuốc nghiêm trọng. Các bác sĩ kê toa các thuốc chống viêm và thuốc kháng vi-rút, nếu nhiễm trùng do vi khuẩn tham gia, họ sẽ tìm kiếm thuốc kháng sinh. Nhân tiện, penicillins trong trường hợp này không được khuyến cáo vì chúng có thể kích thích sự xuất hiện của da nổi mề đay.

Đừng nghĩ rằng nếu một đứa trẻ hoặc thiếu niên bị nhiễm một mononucleosis truyền nhiễm, sau đó các vi-rút Epstein-Barr đã định cư trong cơ thể của mình. Bệnh có các mầm bệnh ít gặp hơn, ví dụ như cytomegalovirus (virus loại mụn rộp 5). Để hiểu những gì các bác sĩ đang giải quyết, họ quy định phân tích cho vi rút Epstein-Barr, và nếu cần thiết, các xét nghiệm khác.

Cũng đúng là nhiễm mononucleosis truyền nhiễm không phải là biểu hiện duy nhất của VEB trong thời thơ ấu. Có những bệnh khác liên quan đến mầm bệnh này, nhưng ở khu vực chúng ta rất hiếm.

Vì vậy, Burkitt lymphoma (cụ thể là VEB của cô là do phát hiện của cô) được tìm thấy chủ yếu ở trẻ em ở các nước châu Phi, rất hiếm khi ở Mỹ, thậm chí ít hơn ở châu Âu (và chỉ chống AIDS). Khối u ác tính có tổn thương các hạch bạch huyết, thận và các cơ quan khác được tìm thấy ở trẻ em từ 3-8 tuổi.

Ung thư vòm họng, một phần đáng kể các u lympho khác, bạch cầu lông ở miệng là tất cả các biểu hiện của VEB so với hậu quả giảm miễn dịch rất nhiều, xảy ra với nhiễm HIV và giai đoạn sau của bệnh AIDS.

Suy giảm miễn dịch bẩm sinh và sự dính mắc của vi rút Epstein-Barr là một hỗn hợp nguy hiểm có thể dẫn đến sự phát triển của một hội chứng tăng sinh ở trẻ. Trong trường hợp này, sự gia tăng số lượng tế bào lympho B dẫn đến sự xuất hiện của một hạt trong nhiều cơ quan, ngăn cản chúng hoạt động bình thường. Đây là một bệnh có tỷ lệ tử vong cao, nhưng đối với nền miễn dịch bình thường nó không phát triển.

Chúng ta có thể nói rằng trong thời thơ ấu, virus Epstein-Barr rất nguy hiểm chủ yếu là do suy giảm miễn dịch do sự biến đổi phức tạp. Trong hầu hết các trường hợp, mọi thứ đều giới hạn ở mononucleosis truyền nhiễm. Mặc dù không cần điều trị đặc biệt, các bác sĩ muốn xác định bản chất của tác nhân gây bệnh, theo đó đứa trẻ được kê toa xét nghiệm máu, xét nghiệm miễn dịch enzyme và CHNDT.

Kể từ khi còn nhỏ, chủ yếu là nhiễm trùng tiểu, rất có thể chỉ giới hạn ở OAK và PRC, điều này khá thông tin trong các bệnh mới được chẩn đoán.

[20], [21], [22], [23], [24], [25], [26], [27], [28], [29], [30], [31]

Hiệu suất bình thường

Việc xử lý các kết quả của phân tích PRC được thực hiện bằng điện di hoặc với việc sử dụng nhãn mác "mồi". Trong trường hợp thứ hai, chỉ cần thêm chất thử (sắc tố) và xác định bằng màu sắc liệu có virion trong mẫu hay không. Một kết quả tích cực của điện di được gọi là khi các sợi DNA khác chiều dài được tìm thấy trong mẫu.

Trong giai đoạn ủ bệnh và người mang virus không triệu chứng, Trung Quốc sẽ cho kết quả âm tính, như trường hợp vắng mặt tuyệt đối của virút trong cơ thể. Khi bắt đầu sự phát triển của nhiễm trùng tiểu và trong giai đoạn đầu của nó, Trung Quốc trong thời gian thực có thể cho kết quả dương tính và âm tính, điều này không làm rõ tình hình.

Nhưng ở độ cao của bệnh (giai đoạn cấp tính), với giai đoạn mạn tính hoặc kích hoạt lại virus (trầm trọng) và trong trường hợp các dạng không điển hình, phân tích sẽ là tích cực. Nếu một người bị bệnh trong một thời gian dài và siêu vi khuẩn trong cơ thể của anh ta đang ở trạng thái không hoạt động, phân tích của PRC sẽ cho kết quả âm tính, nghĩa là việc thực hiện phân tích này trong giai đoạn này cũng không được chú ý, như trong quá sớm thời gian của bệnh.

Cần phải nói rằng kết quả chính xác của loại xét nghiệm này chỉ có thể với nhiễm trùng ban đầu và không có virion của các virut khác.

Bây giờ, liên quan đến xét nghiệm miễn dịch men cho virus Epstein-Barr. Ông có cùng yêu cầu. Sự có mặt của 5 hoặc 6 loại herpesvirus, toxoplasmosis, cũng như nhiễm HIV, có thể bóp méo kết quả không kém gì việc điều trị không cẩn thận trong việc phân tích hoặc chất lượng chất thử kém. Trong trường hợp này, các nghiên cứu bổ sung có thể được yêu cầu, có tính đến các tác nhân gây bệnh có thể có của bệnh.

Các kết quả xét nghiệm bình thường, cho thấy sự vắng mặt của một vi-rút trong cơ thể, được coi là tiêu cực đối với tất cả 4 xét nghiệm: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA và IgG EBNA. Có, mỗi bài kiểm tra được thực hiện riêng, vì các kháng nguyên xuất hiện trong các giai đoạn khác nhau của bệnh. Đôi khi chỉ có một bài kiểm tra đơn lẻ, nhưng trong nhiều trường hợp, cần phải thực hiện tất cả 4 phân tích, nhưng trong các giai đoạn khác nhau của bệnh.

Ví dụ, trong giai đoạn ủ bệnh, như khi không có nhiễm trùng, không có trong bốn loại kháng thể được tìm thấy trong máu. Kết quả như vậy không thể được coi là đủ, bởi vì nó không cho phép phân biệt một người mới bị bệnh từ một người khỏe mạnh.

Khi bắt đầu sự phát triển của bệnh ban đầu, chỉ có kháng thể IgA VCA xuất hiện trong máu. Trong giai đoạn đầu của bệnh, họ được tham gia bởi IgG VCA.

Giai đoạn cấp tính của nhiễm trùng tiểu xảy ra với sự hình thành của ba loại kháng thể: IgG VCA, IgM VCA và IgG EA, với IgG kháng thể phát hiện nhất với kháng nguyên capsid. Thành phần kháng thể này vẫn tồn tại và trong vòng nửa năm sau giai đoạn cấp tính của bệnh, nhưng lượng IgA VCA giảm dần xuống 0.

Sáu tháng sau khi bệnh, các kháng thể của IgG EBNA xuất hiện trong máu, đồng thời immunoglobulin IgG EA trở nên ít hơn và IgM VCA vắng mặt hoàn toàn.

Trong giai đoạn mãn tính của bệnh hoặc việc kích hoạt lại virus, có thể có các chỉ số khác nhau. Thông thường, cả bốn loại kháng thể đều được tìm thấy trong máu. Nhưng cũng có thể là các globulin miễn dịch IgH VCA và IgG EBNA không tìm thấy.

Sự phức tạp của nhiễm virut theo quy trình khối u xảy ra khi không có các kháng thể IgG VCA, và immunoglobulin globulin IgG không được phát hiện trong tất cả các trường hợp.

Tuy nhiên, xét nghiệm miễn dịch men không chỉ xác định các kháng thể nhất định mà còn cả nồng độ của chúng, cho phép chúng ta đánh giá chính xác hơn về giai đoạn bệnh lý cũng như những hậu quả có thể xảy ra. Không cần phải nói về những con số cụ thể. Sau cùng, mỗi phòng thí nghiệm phân tích một trong những cách có thể, bằng cách sử dụng các chất thử khác nhau, do đó, trong thiết kế kỹ thuật số, kết quả phân tích các phòng thí nghiệm khác nhau có thể khác nhau.

Bệnh nhân có trách nhiệm phát hành một mẫu, trong đó các giá trị ngưỡng (tham chiếu) của các giá trị sẽ được chỉ định. Nếu kết quả nằm dưới ngưỡng, điều này được coi là một chỉ báo bình thường (tiêu cực). Nếu số lượng xác định cao hơn giá trị tham chiếu, mọi thứ đều cho kết quả dương tính, có nghĩa là virus sống trong cơ thể. Giá trị của giá trị xác định cho thấy giai đoạn của bệnh và quần thể sinh vật do virion VEB, tức là về mức độ nghiêm trọng của bệnh lý.

Nếu ELISA đưa ra một kết quả tiêu cực, nó chỉ cho thấy rằng trong quá khứ, một người không có liên lạc với VEB. Nhưng hiện tại có một loại virus có trong cơ thể để nói với sự chắc chắn là không thể. Một kết quả tiêu cực có thể gây ấp các mầm bệnh trong cơ thể và mang vi rút không triệu chứng. Đôi khi, để đảm bảo rằng vi rút không bị nhiễm bệnh do cơ thể, cần phải thực hiện một loạt các thử nghiệm thứ hai sau một thời gian.

Nếu kết quả của xét nghiệm miễn dịch enzyme trên virus Epstein-Barr chỉ cao hơn một chút so với các giá trị tham khảo, kết quả sẽ được xem là không chắc chắn. Nguyên nhân thường trở thành giai đoạn sớm của bệnh hoặc sự hiện diện trong cơ thể của virion của virus khác. Trong trường hợp này, sau 2 tuần, bạn nên làm một xét nghiệm thứ hai cho VEB và có thể là đối với các mầm bệnh khác.

[32], [33], [34], [35], [36], [37], [38], [39], [40], [41], [42]

Đối với câu hỏi về bao nhiêu phân tích được thực hiện cho các virus Epstein-Barr và khi có thể chờ kết quả, sau đó không có những khó khăn đặc biệt mong đợi. Trong một phòng thí nghiệm được trang bị tốt nghiêm túc, câu trả lời sẽ phải chờ đợi không quá 2 ngày sau khi phân phát vật liệu sinh học. Trong trường hợp cần phân tích khẩn cấp, bạn có thể nhận được câu trả lời ngay cả sau vài giờ.

Để tiến hành phân tích vi rút Epstein-Barr, cần thiết trong một phòng thí nghiệm được kiểm nghiệm, nơi có cả chất phản ứng có chất lượng và các chuyên gia có trình độ. Tuy nhiên, nghiên cứu chi phí tiền (và không nhỏ, phân tích cho một loại kháng thể chi phí khoảng 150-170 UAH.), Và tôi không muốn có được một kết quả sai, nhưng sau đó có thể trở lại phòng thí nghiệm khác, để tái phân tích. 

[43], [44], [45], [46], [47], [48], [49]