Xét nghiệm máu tìm kháng thể virus Epstein-Barr và PCR: cách vượt qua, tiêu chuẩn

Khi nhắc đến herpes, chúng ta thường hiểu đến những vết phát ban phồng rộp đau đớn, khó coi trên mặt ở vùng môi, sau đó hình thành nên lớp vảy màu nâu. Than ôi, đây chỉ là một trong những dạng của virus herpes, có thể xuất hiện ở người dưới 8 dạng. Những gì chúng ta thường gọi là herpes là virus loại 1 hoặc virus herpes simplex. Virus loại 2 gây ra herpes sinh dục, loại 3 - "thủy đậu" và bệnh zona, loại 4 - bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng và một số bệnh lý khá nguy hiểm khác, v.v. Danh sách này có thể được tiếp tục, nhưng chúng ta sẽ tập trung vào virus herpes loại 4, còn được gọi là virus Epstein-Barr. Chúng ta hãy cố gắng tìm hiểu xem virus herpes loại 4 là gì, tại sao nó lại nguy hiểm, khi nào và tại sao phải thực hiện xét nghiệm virus Epstein-Barr, và kết quả xét nghiệm trong phòng thí nghiệm cho biết điều gì.

Virus herpes loại 4 là gì?

Herpesvirus loại 4, là một trong những loại nhiễm trùng herpesvirus, đã được mô tả cách đây 53 năm bởi nhà virus học người Anh Michael Epstein. Trong công trình nghiên cứu của mình, giáo sư đã được hỗ trợ bởi sinh viên sau đại học Yvonne Barr. Chính những người này đã đặt tên cho loại virus này. Tuy nhiên, 15 năm sau khi phát hiện ra loại virus này, tên khoa học của nó đã được đổi thành human herpesvirus 4, và một năm trước, loại virus này được gọi là human gammavirus type 4.

Nhưng virus Epstein-Barr là gì? Giống như bất kỳ loại virus nào khác, virion (hạt virus) của virus herpes loại 4 bao gồm vật liệu di truyền (trong trường hợp này là DNA sợi đôi) và vỏ protein xung quanh (capsid). Ngoài ra, virus được bao quanh bởi một màng giúp nó dễ dàng xâm nhập vào tế bào của vật chủ.

Bất kỳ loại vi-rút nào cũng là dạng không phải tế bào, là yếu tố gây nhiễm trùng và không thể phát triển và sinh sản bên ngoài các tế bào của một sinh vật sống. Môi trường sống ưa thích của vi-rút herpes loại 4 được coi là các tế bào biểu mô của vòm họng. Chúng cũng không coi thường các tế bào bạch cầu, ưu tiên một trong những loại của chúng, được gọi là tế bào lympho B. Chính các tế bào B tham gia tích cực vào việc cung cấp khả năng phòng vệ miễn dịch của cơ thể. Khi tiếp xúc với một kháng nguyên, trong trường hợp của chúng ta là vi-rút herpes loại 4 (hay đúng hơn là các kháng nguyên của nó), các tế bào lympho B sản xuất ra kháng thể (protein immunoglobulin). Chúng có thể được phát hiện trong máu của bệnh nhân bằng cách tiến hành phân tích vi-rút Epstein-Barr (EBV).

Virus herpes loại 4 có 4 kháng nguyên xuất hiện theo trình tự được xác định nghiêm ngặt:

• EA là kháng nguyên sớm xuất hiện ở giai đoạn đầu của bệnh, khi các hạt virus đang trong giai đoạn tổng hợp (nhiễm trùng cấp tính nguyên phát hoặc tái hoạt động của virus tiềm ẩn khi khả năng miễn dịch giảm),
• VCA là kháng nguyên vỏ có trong vỏ protein và cũng thuộc loại sớm, vì về mặt lâm sàng bệnh có thể chưa biểu hiện ở giai đoạn này.
• MA – kháng nguyên màng, xuất hiện khi virion đã được hình thành,
• EBNA – kháng nguyên hạt nhân (polypeptide hoặc hạt nhân) là một trong những kháng nguyên muộn, kháng thể có thể được phát hiện thậm chí nhiều tháng sau khi mắc bệnh và tồn tại trong máu suốt cuộc đời.

Virus herpes loại 4 rất nguy hiểm. Vì virus này không hoạt động bên ngoài cơ thể sống nên nó chỉ có thể lây nhiễm từ người là nguồn lây nhiễm. Và không nhất thiết người đó phải biểu hiện tất cả các triệu chứng của bệnh; bệnh có thể tiềm ẩn, ngụy trang dưới dạng mệt mỏi thông thường. Ví dụ, hội chứng mệt mỏi mãn tính trong hầu hết các trường hợp đều liên quan đến virus Epstein-Barr.

Các virion riêng lẻ có thể được tìm thấy trong máu, nước bọt, tinh trùng, dịch tiết âm đạo và mô của nhiều cơ quan khác nhau. Các hạt vi-rút, cùng với nước bọt và máu, có thể xâm nhập vào các vật thể xung quanh chúng ta, nơi chúng sẽ ở trạng thái không hoạt động cho đến khi chúng bằng cách nào đó xâm nhập vào cơ thể con người. Trong phần lớn các trường hợp, nhiễm trùng xảy ra do các giọt bắn trong không khí hoặc tiếp xúc (thông qua hôn). Nhưng việc lây truyền vi-rút trong tử cung từ mẹ sang thai nhi, nhiễm trùng trong quá trình truyền máu (nếu máu của người hiến tặng có chứa vi-rút vi-rút) và tiếp xúc tình dục cũng có thể xảy ra.

Sau khi xâm nhập vào cơ thể và thâm nhập vào các cấu trúc tế bào, có thể mất từ 5 đến 50 ngày trước khi bệnh tự biểu hiện. Nhưng bệnh có thể không tự biểu hiện, tiến triển ở dạng tiềm ẩn, như trong hầu hết các trường hợp.

Vâng, theo nghiên cứu, khoảng 90% dân số trưởng thành đã từng bị nhiễm herpes liên quan đến EBV ít nhất một lần trong đời. Hầu hết mọi người thậm chí không biết điều đó vì cơ thể họ có khả năng chống lại sự tấn công của vi-rút. Nhưng điều này không phải lúc nào cũng đúng.

Virus Epstein-Barr biểu hiện như thế nào?

Thông thường, các bác sĩ phải xử lý các loại nhiễm trùng herpesvirus loại 4 sau đây trong quá trình hành nghề:

• Dạng mãn tính (xảy ra sau giai đoạn cấp tính của bệnh, có một số triệu chứng chung của tình trạng sức khỏe kém),
• Dạng tiềm ẩn hoặc ẩn (không có triệu chứng, nhưng vi-rút vẫn hoạt động và được giải phóng vào môi trường),
• Dạng chậm (ít phổ biến hơn, các triệu chứng xuất hiện từng cái một trong thời gian dài, dẫn đến tử vong ở bệnh nhân).

Mọi người lần đầu tiên bị nhiễm virus Epstein-Barr, chủ yếu ở thời thơ ấu và thanh thiếu niên. Tỷ lệ mắc bệnh cao nhất xảy ra ở độ tuổi từ 14 đến 18.

Nhiễm trùng virus nguyên phát có 3 dạng khác nhau:

• không có triệu chứng (không có biểu hiện lâm sàng),
• hô hấp (các triệu chứng nhiễm trùng đường hô hấp: sốt, chảy nước mũi, suy nhược toàn thân, v.v.),
• Bệnh tăng bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng có bộ ba triệu chứng chính: sốt cao, đau họng có vảy vàng trên amidan, các cơ quan như gan, lách to; bạch cầu tăng và hạch bạch huyết to.

Có một số phương án giúp thoát khỏi giai đoạn cấp tính của bệnh:

• phục hồi hoàn toàn,
• các triệu chứng của bệnh biến mất, nhưng vi-rút vẫn còn trong cơ thể và phát triển, mặc dù nó không còn dẫn đến những thay đổi đáng chú ý trong các tế bào (trạng thái mang mầm bệnh),
• không có triệu chứng của bệnh, virus không rời khỏi cơ thể, nhưng cũng biểu hiện ít hoạt động (dạng tiềm ẩn),
• sự tái hoạt động của vi-rút từ dạng tiềm ẩn,
• quá trình nhiễm trùng mãn tính (với các đợt tái phát của bệnh, dạng hoạt động mãn tính, toàn thân bị tổn thương các cơ quan và hệ thống cơ thể).

Hậu quả của việc virus lưu lại lâu trong cơ thể có thể là:

• Dạng mãn tính của bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng.
• Hội chứng thực bào máu: sốt ổn định, giảm các thành phần máu (tăng khả năng đông máu), gan và lách to, chảy máu niêm mạc, vàng da (do rối loạn chức năng gan), hạch to, triệu chứng thần kinh.
• Dạng tiềm ẩn với sự phát triển của tình trạng suy giảm miễn dịch thứ phát: tăng thân nhiệt kéo dài, suy nhược toàn thân, hạch bạch huyết to và đau, đau cơ và khớp, thường xuyên mắc các bệnh truyền nhiễm.
• Sự phát triển của các bệnh lý tự miễn dưới dạng lupus ban đỏ, viêm khớp dạng thấp, v.v.
• Biểu hiện của hội chứng mệt mỏi mãn tính với sự suy giảm sức khỏe tổng thể và hiệu suất làm việc.
• Dạng nhiễm trùng mãn tính toàn thân gây tổn thương hệ thần kinh trung ương, cơ tim, thận, gan và phổi.
• Phát triển các bệnh ung thư (bệnh bạch cầu lymphocytic và u lympho), trong đó quan sát thấy sự gia tăng bệnh lý về số lượng tế bào hệ thống bạch huyết. Virus herpes loại 4 không phá hủy các tế bào mang mầm bệnh, nhưng buộc chúng phải tích cực nhân lên, do đó phát hiện ra các khối u từ mô lymphoid.

Như chúng ta có thể thấy, virus Epstein-Barr không vô hại như thoạt nhìn, điều đó có nghĩa là không nên xử lý nó một cách bất cẩn. Hơn nữa, virus herpes loại 4 được đặc trưng bởi các đợt mang virus thường xuyên và dạng tiềm ẩn, chưa kể đến nhiều dạng nhiễm trùng mãn tính, khi một người vẫn là nguồn lây nhiễm mà thậm chí không nghi ngờ gì.

Trong trường hợp này, sự hiện diện của tác nhân truyền nhiễm trong cơ thể chỉ có thể được xác định bằng cách sử dụng phân tích đặc biệt đối với virus Epstein-Barr, vật liệu sinh học thường là máu.

Chỉ định cho thủ tục Xét nghiệm virus Epstein-Barr.

Vì nhiễm virus herpes loại 4 đôi khi không dễ phát hiện nên không phải lúc nào cũng bị nghi ngờ. Nhưng có một số dấu hiệu nhất định mà bác sĩ có thể nghi ngờ sự hiện diện của virus trong cơ thể:

• hệ thống miễn dịch bị suy yếu nghiêm trọng (bệnh nhân nhiễm HIV và AIDS, bệnh nhân sau khi ghép tạng hoặc hóa trị có nguy cơ),
• sự sưng to của các hạch bạch huyết khu vực ở cằm và vùng chẩm của đầu và đau nhức, đặc biệt nếu điều này được quan sát thấy sau khi truyền máu hoặc ghép tạng từ người hiến tặng.
• nhiễm trùng đường hô hấp cấp tính do virus (ARVI), xảy ra trong bối cảnh nhiệt độ rất cao (38-40 độ),
• sự xuất hiện các dấu hiệu của bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng, thường xảy ra dưới ảnh hưởng của virus Epstein-Barr.

Ngay cả khi một người không có các triệu chứng nêu trên, bác sĩ chuyên khoa vẫn có thể nghi ngờ dựa trên một số kết quả xét nghiệm thường quy (phân tích máu tổng quát và sinh hóa), cũng như các nghiên cứu về tình trạng miễn dịch.

Xét nghiệm công thức máu toàn phần để tìm virus Epstein-Barr có thể cho thấy:

• tăng số lượng tế bào lympho,
• lượng hemoglobin thấp, biểu thị mức độ hồng cầu giảm,
• tăng đông máu do số lượng tiểu cầu lớn,
• sự xuất hiện của các tế bào virus (tế bào lympho bất thường có cấu trúc tương tự như tế bào đơn nhân).

Xét nghiệm máu sinh hóa, cung cấp thông tin về tình trạng của các cơ quan nội tạng, sẽ cho thấy những thay đổi trong hoạt động của gan và lá lách.

Xét nghiệm miễn dịch đối với EBV có thể cho thấy sự thay đổi về số lượng tế bào lympho cụ thể, sự khác biệt về số lượng globulin miễn dịch của các lớp khác nhau (rối loạn globulin miễn dịch) và sự thiếu hụt globulin miễn dịch G, cho thấy hệ thống miễn dịch yếu và không có khả năng ngăn chặn sự tấn công của vi-rút.

Những kết quả phân tích không cụ thể như vậy có thể cảnh báo các bác sĩ, nhưng vẫn không thể nói chính xác họ đang phải đối mặt với điều gì. Mọi thứ sẽ vẫn ở giai đoạn giả định và chẩn đoán sơ bộ. Trong hầu hết các trường hợp, các bác sĩ nghi ngờ một dạng tiềm ẩn của bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng, mặc dù các bệnh lý do vi-rút khác (cúm, viêm gan, v.v.) có thể biểu hiện theo cùng một cách.

Do tỷ lệ mắc viêm gan loại 4 cao và khả năng lây truyền từ mẹ sang con, xét nghiệm virus Epstein-Barr cũng sẽ hữu ích khi lập kế hoạch mang thai. Nếu người mẹ đã từng bị nhiễm trùng trước đó, cơ thể bà đã phát triển kháng thể chống lại nó. Nhiễm trùng lại thường bị loại trừ do hình thành khả năng miễn dịch mạnh và nếu nó xảy ra, nó sẽ không còn hậu quả có thể xảy ra khi tiếp xúc với vi-rút lần đầu. Khả năng miễn dịch sẽ hạn chế hoạt động của vi-rút trong suốt cuộc đời, mặc dù bản thân vi-rút sẽ vẫn tồn tại bên trong cơ thể, giống như bất kỳ loại vi-rút herpes nào.

Nếu bà mẹ tương lai bị nhiễm virus herpes trong thời kỳ mang thai, điều này có thể dẫn đến sảy thai và sinh non, hoặc virus sẽ ảnh hưởng tiêu cực đến sự phát triển trong tử cung của thai nhi.

Bác sĩ chuyên khoa ung thư có thể yêu cầu xét nghiệm EBV nếu nghi ngờ u lympho Burkett hoặc để chẩn đoán quá trình khối u ở những người nhiễm HIV. Bác sĩ trị liệu có thể sử dụng xét nghiệm này để chẩn đoán nhiễm herpes (chẩn đoán phân biệt để xác định loại vi-rút). Đôi khi xét nghiệm cũng được sử dụng để đánh giá hiệu quả của phương pháp điều trị.

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ], [ 6 ], [ 7 ], [ 8 ], [ 9 ]

Chuẩn bị

Tùy thuộc vào loại nghiên cứu, vật liệu sinh học cho nó có thể là máu, nước bọt, nước tiểu, đờm, mẫu nước ối, dịch lấy từ ống cổ tử cung hoặc niệu đạo, dịch não tủy (CSF). Thông thường, bác sĩ dùng đến xét nghiệm máu, được coi là thông tin hữu ích nhất.

Rõ ràng là một số yếu tố có thể ảnh hưởng tiêu cực đến chất lượng và số lượng vật liệu sinh học, vì vậy, bạn nên tuân thủ một số quy tắc nhất định vào ngày trước đó:

• Bất kỳ xét nghiệm nào (đặc biệt là xét nghiệm máu) đều được khuyến cáo nên thực hiện vào buổi sáng khi bụng đói. Bữa ăn cuối cùng không được muộn hơn 12 giờ trước khi lấy mẫu máu, vì vậy tốt hơn là nên uống nước vào bữa tối.
• Vật liệu được chấp nhận nhất để phân tích virus Epstein-Barr được coi là máu tĩnh mạch và trước khi hiến máu từ tĩnh mạch, luôn nên nghỉ ngơi 15 phút nếu một người vừa đến phòng xét nghiệm.
• Để đảm bảo việc lấy mẫu máu diễn ra mà không có hậu quả và kết quả xét nghiệm là đáng tin cậy, không nên hoạt động thể chất mạnh hoặc chơi thể thao, uống rượu hoặc hút thuốc trong vòng 12 giờ trước khi tiến hành xét nghiệm.
• Kết quả xét nghiệm cũng có thể bị ảnh hưởng bởi các loại thuốc bạn đang dùng. Bạn nên ngừng dùng thuốc ít nhất 2 ngày trước khi xét nghiệm. Nếu không thể, bạn phải thông báo cho y tá phòng xét nghiệm về các loại thuốc bạn đang dùng.
• Trong thời kỳ mang thai, trước khi xét nghiệm EBV, xét nghiệm toxoplasma sẽ được thực hiện để loại trừ phản ứng dương tính giả.
• Nếu xét nghiệm máu tìm virus Epstein-Barr cho trẻ em dưới 5 tuổi, nửa giờ trước khi tiến hành xét nghiệm, trẻ cần được uống nhiều nước đun sôi thành từng ngụm nhỏ.

Nếu lấy một vật liệu sinh học khác để phân tích, bạn cần làm rõ trước với bác sĩ về mọi sắc thái của quá trình chuẩn bị để phân tích tùy thuộc vào vật liệu được sử dụng.

[ 10 ], [ 11 ], [ 12 ]

Kỹ thuật Xét nghiệm virus Epstein-Barr.

Các bác sĩ giao một vai trò quan trọng trong chẩn đoán herpes loại 4 và bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng cho các xét nghiệm cụ thể giúp xác định DNA của vi-rút hoặc kháng thể duy nhất trong vật liệu sinh học của bệnh nhân. Các loại xét nghiệm trong phòng thí nghiệm chính được sử dụng để phát hiện vi-rút Epstein-Barr trong cơ thể người bao gồm xét nghiệm miễn dịch hấp thụ liên kết với enzyme (ELISA) và chẩn đoán PCR. Chúng ta hãy xem xét kỹ hơn bản chất của cả hai phương pháp và các tính năng triển khai của chúng.

Xét nghiệm miễn dịch men EBV

ELISA là một nghiên cứu (phân tích) máu tĩnh mạch của bệnh nhân để tìm kháng thể đối với virus Epstein-Barr. Kết quả chẩn đoán, các globulin miễn dịch loại IgG hoặc IgM (tổng cộng có 5 loại) đối với một trong 3 kháng nguyên của virus (sớm, capsid hoặc nhân) được phát hiện trong máu của bệnh nhân mắc EBV.

Phân tích được thực hiện trong phòng xét nghiệm miễn dịch, nơi khoảng 10 ml máu được lấy từ tĩnh mạch của bệnh nhân. Sau đó, vật liệu sinh học được để ở nhiệt độ phòng trong một phần tư giờ, trong thời gian đó máu sẽ đông lại. Cục máu đông được tách cẩn thận khỏi phần chất lỏng. Chất lỏng được ly tâm và thu được huyết thanh máu tinh khiết. Đây chính là thứ được đưa vào xét nghiệm thêm.

Ý tưởng về phương pháp này xuất phát từ dữ liệu cho thấy cơ thể chúng ta sản sinh ra các kháng thể đặc hiệu với từng loại vi-rút và vi khuẩn xâm nhập vào cơ thể từ bên ngoài. Cơ thể nhận diện chúng như những vật lạ và tiêu diệt chúng bằng các kháng thể đặc hiệu bám chặt vào kháng nguyên.

Bản chất của phân tích ELISA dựa trên phản ứng này. Các kháng thể có gắn thẻ kết hợp với kháng nguyên. Một chất được áp dụng cho các thẻ, làm thay đổi màu sắc của mẫu khi phản ứng với một loại enzyme đặc biệt. Càng nhiều "chuỗi" như vậy, màu sắc của vật liệu sinh học càng đậm.

Xét nghiệm miễn dịch enzym có thể được thực hiện bằng ba phương pháp:

• ELISA trực tiếp. Chất lỏng thử nghiệm được đặt trong các giếng và để trong khoảng nửa giờ để các kháng nguyên có thể bám vào thành giếng. Chất lỏng có kháng thể được đánh dấu được thêm vào các kháng nguyên đã hấp thụ. Sau thời gian cần thiết (từ nửa giờ đến 5 giờ), khi các kháng thể đã phát hiện và liên kết với các kháng nguyên, chất lỏng được xả ra, các giếng được rửa cẩn thận và enzyme được thêm vào chúng. Nồng độ của vi-rút trong một đơn vị máu được xác định bằng phương pháp tô màu.
• ELISA gián tiếp. Trong phương pháp này, huyết thanh máu được thử nghiệm và kháng thể được gắn nhãn được thêm vào các kháng nguyên được hấp thụ trên bề mặt của các giếng. Kết quả là, thu được 2 loại dây chằng, một số trong số đó được gắn nhãn. Kết quả phụ thuộc vào nồng độ kháng nguyên trong mẫu được thử nghiệm. Càng nhiều kháng thể không được gắn nhãn, càng ít hợp chất được gắn nhãn bởi enzyme.

Tiếp theo, một thuốc thử đặc biệt được thêm vào thành phần đã rửa, được sử dụng để xác định hoạt động enzym của phức hợp kháng nguyên-kháng thể.

• "Sandwich". Khác với phương pháp gián tiếp ở chỗ ban đầu, không phải kháng nguyên mà là kháng thể được hấp phụ trên bề mặt. Một dung dịch chứa kháng nguyên đang được nghiên cứu được thêm vào chúng. Sau khi rửa chất mang, các kháng thể có nhãn enzym được thêm vào. Các kháng thể dư thừa được loại bỏ một lần nữa và, bằng cách sử dụng hydro peroxide, một chất màu được thu được, được nghiên cứu bằng phương pháp quang phổ.

Loại phân tích này không chỉ cho phép xác định các kháng thể cụ thể và xác định nồng độ kháng nguyên mà còn làm rõ giai đoạn của bệnh. Thực tế là các kháng nguyên khác nhau của virus Epstein-Barr xuất hiện ở các giai đoạn khác nhau của bệnh nhiễm herpes, điều đó có nghĩa là các kháng thể đối với chúng được sản xuất tại một thời điểm nhất định của bệnh.

Do đó, kháng thể IgG đối với kháng nguyên sớm (IgG EA) xuất hiện trong máu 1-2 tuần sau khi nhiễm trùng, khi bệnh đang ở giai đoạn cấp tính hoặc giai đoạn tái hoạt động của vi-rút. Các globulin miễn dịch loại này biến mất sau 3-6 tháng. Trong quá trình nhiễm vi-rút mãn tính, các kháng thể như vậy đặc biệt nhiều và ở dạng không điển hình, chúng hoàn toàn không có.

Kháng thể IgG đối với kháng nguyên vỏ (IgG VCA) cũng xuất hiện sớm, trong 4 tuần đầu tiên của bệnh, nhưng số lượng lớn nhất của chúng được xác định bởi tháng thứ hai của nhiễm trùng. Trong giai đoạn cấp tính, chúng được tìm thấy ở hầu hết bệnh nhân, nhưng chúng có thể không xuất hiện ở trẻ em. Trong quá trình mãn tính của bệnh, đặc biệt là trong thời gian virus tái hoạt động, lượng IgG VCA đặc biệt cao. Những kháng thể này tồn tại trong máu người mãi mãi, giống như chính virus, cho thấy khả năng miễn dịch đã hình thành đối với tác nhân gây nhiễm trùng.

Kháng thể IgM đối với kháng nguyên vỏ (IgM VCA) có thể xuất hiện ngay cả trước khi có dấu hiệu đầu tiên của bệnh. Nồng độ (titer) của chúng đặc biệt cao trong 6 tuần đầu tiên của bệnh. Loại kháng thể này đặc trưng cho nhiễm trùng cấp tính và tái hoạt động của nhiễm trùng mãn tính. IgM VCA biến mất sau 1-6 tháng.

Kháng thể IgG đối với gen hạt nhân (IgG EBNA) có thể chỉ ra rằng một người đã từng trực tiếp gặp phải nhiễm trùng herpes. Trong giai đoạn cấp tính của bệnh, chúng được phát hiện cực kỳ hiếm, thường xuất hiện trong thời gian phục hồi (tháng thứ 3-10). Chúng có thể được phát hiện trong máu nhiều năm sau khi nhiễm trùng.

Phát hiện từng kháng nguyên riêng lẻ không cung cấp bức tranh toàn cảnh về bệnh, do đó, các xét nghiệm tìm kháng thể khác nhau nên được thực hiện cùng nhau. Ví dụ, nếu chỉ có IgM VCA và không phát hiện thấy IgG EBNA, thì đây là nhiễm trùng nguyên phát.

Thật không may, xét nghiệm miễn dịch enzyme thường không đủ để phát hiện nhiễm herpes nguyên phát hoặc bệnh lý bẩm sinh. Trong trường hợp sau, kháng thể có thể không được phát hiện. Là một xét nghiệm xác nhận bệnh nguyên phát, một nghiên cứu phân tử về máu hoặc vật liệu sinh học khác đối với virus Epstein-Barr được sử dụng.

Phân tích PRC cho virus Epstein-Barr

Phân tích này được thực hiện ở giai đoạn nhiễm trùng nguyên phát cấp tính, nếu không kết quả sẽ không chính xác.

Bản chất của phương pháp PCR (phản ứng chuỗi đa chiều) là mỗi tác nhân truyền nhiễm có bộ gen riêng chứa trong phân tử DNA. DNA của tác nhân gây bệnh được chứa trong vật liệu sinh học được lấy để nghiên cứu với số lượng nhỏ (bản thân vi-rút có kích thước hiển vi), vì vậy rất khó để đánh giá tình hình. Nhưng nếu thực hiện một phản ứng cụ thể, lượng vật liệu di truyền sẽ tăng lên đáng kể, điều này sẽ giúp có thể đặt tên cho tác nhân gây bệnh.

Sử dụng các dụng cụ dùng một lần, vật liệu được lấy để nghiên cứu phân tử, được đặt trong một thiết bị đặc biệt để phân tích. Thiết bị là một bộ điều nhiệt có chương trình đặc biệt - một máy tuần hoàn nhiệt hoặc bộ khuếch đại. Thiết bị chạy một chu kỳ PRC đầy đủ vài chục lần (khoảng 2-3 phút), có 3 giai đoạn:

• Biến tính (ở nhiệt độ 95 độ, các sợi DNA bị tách ra).
• Ủ (ở nhiệt độ 75 độ, các “mồi” được chuẩn bị đặc biệt cho EBV được đưa vào vật liệu đang được nghiên cứu, chúng sẽ bám vào DNA của vi-rút).
• Mở rộng hoặc nhân lên vật liệu di truyền (một loại enzyme đặc biệt được thêm vào hạt giống ở nhiệt độ 72 độ, giúp tái tạo chuỗi DNA mới, do đó tăng gấp đôi lượng vật liệu di truyền).

Nếu toàn bộ chu kỳ của phản ứng đa chiều được thực hiện 50 lần, lượng vật liệu sẽ tăng lên 100 lần. Điều này có nghĩa là sẽ dễ dàng hơn nhiều để xác định tác nhân gây bệnh.

Xét nghiệm virus Epstein-Barr cho trẻ em

Như chúng ta đã biết, virus Epstein-Barr có thể gây ra nhiều bệnh. Một khi đã xâm nhập vào cơ thể con người, nó vẫn là cư dân thường trú, và chỉ có hoạt động phối hợp tốt của hệ thống miễn dịch mới không cho phép nó tích cực ký sinh bên trong tế bào.

Gần 95% dân số trưởng thành trên thế giới sống với EBV bên trong, và hầu hết trong số họ đã làm quen với loại vi-rút này từ khi còn nhỏ. Một số người thừa hưởng nó từ mẹ của họ, trong khi những người khác bị nhiễm vi-rút từ cha mẹ và người thân vội vã hôn đứa trẻ, hoặc qua các giọt bắn trong không khí ở trường mẫu giáo hoặc trường học (các bệnh truyền nhiễm ở đó thường có tỷ lệ "phổ biến").

Trẻ nhỏ thường có xu hướng cho mọi thứ vào miệng, và số lượng virion lớn nhất được tìm thấy trong nước bọt. Và nếu nhiều trẻ em liếm cùng một món đồ chơi ở trường mẫu giáo trong khi giáo viên bận rộn với công việc của mình, thì không có gì ngạc nhiên khi vi-rút lây lan rất tích cực trong các nhóm trẻ em lớn.

EBV có thể dễ dàng được gọi là bệnh của trẻ em và thanh thiếu niên, bởi vì đến tuổi vị thành niên, một nửa số trẻ em đã có vi-rút trong cơ thể (và đến tuổi 30, khoảng 90% người lớn). Trẻ em ở các độ tuổi khác nhau bị bệnh theo cách riêng của chúng. Trong vòng một năm, khi trẻ không giao tiếp tích cực với mọi người, khả năng trẻ bị bệnh là rất nhỏ. Một đứa trẻ trên một tuổi, ngay cả khi chưa đi mẫu giáo, trở nên hòa đồng hơn, chơi với bạn bè trên phố, đi mua sắm năng động với mẹ, v.v., và khả năng mắc vi-rút trở nên cao hơn nhiều.

Nhưng đây không phải là lý do để nhốt trẻ trong 4 bức tường. Ở độ tuổi từ 1-3 tuổi, trong phần lớn các trường hợp, bệnh tiến triển mà không có bất kỳ triệu chứng nào, ngoại trừ có thể có sốt nhẹ và sổ mũi nhẹ, giống như cảm lạnh. Hóa ra, trẻ làm quen với vi-rút càng sớm thì quá trình làm quen đó càng dễ dàng.

Trẻ bị bệnh mà không có kháng thể IgG VCA trong máu thì không tốt, điều này có thể chỉ ra rằng khả năng miễn dịch với virus chưa được hình thành và virus có thể tái hoạt ngay khi hệ thống miễn dịch suy yếu. Nguyên nhân rất có thể là do hệ thống miễn dịch của trẻ nhỏ chưa hoàn thiện, đang trong quá trình hình thành trong nhiều năm.

Cuộc sống ở trường học cung cấp nhiều điều kiện tiên quyết hơn cho căn bệnh này, đặc biệt là ở tuổi vị thành niên, khi những người trẻ tuổi tích cực thực hành hôn. Nhưng ở trẻ em trên 3 tuổi, căn bệnh này ít khi không có triệu chứng. Trong hầu hết các trường hợp, các bác sĩ gặp phải bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng với các triệu chứng đặc trưng của nó.

Mặc dù bệnh lý có thể kéo dài (khoảng 2 tháng), nhưng không quá nguy hiểm và không cần dùng thuốc nghiêm trọng. Bác sĩ kê đơn thuốc chống viêm và thuốc kháng vi-rút, nếu nhiễm trùng do vi khuẩn đi kèm, họ sẽ tìm kiếm sự trợ giúp từ thuốc kháng sinh. Nhân tiện, penicillin không được khuyến khích trong trường hợp này vì chúng có thể gây ra phát ban trên da.

Đừng nghĩ rằng nếu trẻ em hoặc thanh thiếu niên mắc bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng, điều đó có nghĩa là virus Epstein-Barr đã cư trú trong cơ thể chúng. Bệnh này có các tác nhân gây bệnh ít phổ biến khác, chẳng hạn như cytomegalovirus (virus herpes loại 5). Để hiểu được họ đang phải đối mặt với điều gì, bác sĩ kê đơn xét nghiệm virus Epstein-Barr và nếu cần thiết, các xét nghiệm trong phòng thí nghiệm khác.

Cũng đúng là bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng không phải là biểu hiện duy nhất của EBV ở trẻ em. Có những bệnh khác liên quan đến tác nhân gây bệnh này, nhưng ở khu vực của chúng tôi, chúng rất hiếm.

Do đó, u lympho Burkitt (là nguyên nhân khiến EBV được phát hiện) chủ yếu được tìm thấy ở trẻ em ở các nước châu Phi, rất hiếm khi ở châu Mỹ và thậm chí còn hiếm hơn ở châu Âu (và chỉ trong bối cảnh AIDS). Một khối u hàm có tổn thương hạch bạch huyết, thận và các cơ quan khác được tìm thấy ở trẻ em từ 3-8 tuổi.

Ung thư vòm họng, một tỷ lệ đáng kể các bệnh u lympho khác, bệnh bạch sản lông ở miệng - tất cả những bệnh này đều là biểu hiện của EBV trên nền tảng hệ miễn dịch suy giảm nghiêm trọng, xảy ra khi nhiễm HIV và giai đoạn cuối của AIDS.

Suy giảm miễn dịch bẩm sinh và sự bổ sung của virus Epstein-Barr là một hỗn hợp nguy hiểm có thể dẫn đến sự phát triển của hội chứng tăng sinh ở trẻ em. Trong trường hợp này, sự gia tăng số lượng tế bào lympho B dẫn đến sự xuất hiện của các hạt trong nhiều cơ quan, ngăn cản chúng hoạt động bình thường. Đây là một căn bệnh có tỷ lệ tử vong cao, nhưng nó không phát triển trên nền tảng miễn dịch bình thường.

Có thể nói rằng ở trẻ em, virus Epstein-Barr nguy hiểm chủ yếu trong các trường hợp suy giảm miễn dịch do phát triển các biến chứng khác nhau. Trong hầu hết các trường hợp, mọi thứ đều giới hạn ở bệnh bạch cầu đơn nhân nhiễm trùng. Và mặc dù không cần điều trị đặc biệt, các bác sĩ vẫn thích xác định bản chất của tác nhân gây bệnh, theo đó trẻ được chỉ định xét nghiệm máu tổng quát, xét nghiệm miễn dịch men và PCR.

Vì nhiễm trùng nguyên phát chủ yếu xảy ra ở trẻ em nên bạn hoàn toàn có thể giới hạn bản thân chỉ bằng xét nghiệm công thức máu toàn phần và PCR, đây là những xét nghiệm khá hữu ích khi phát hiện bệnh lần đầu.

[ 13 ], [ 14 ], [ 15 ], [ 16 ], [ 17 ], [ 18 ], [ 19 ], [ 20 ], [ 21 ], [ 22 ]

Hiệu suất bình thường

Kết quả phân tích PCR được xử lý bằng điện di hoặc sử dụng "mồi" có nhãn. Trong trường hợp sau, chỉ cần thêm thuốc thử (chất tạo màu) và xác định bằng màu xem có virion trong mẫu hay không. Kết quả điện di dương tính được chỉ ra khi phát hiện thấy các sợi DNA có độ dài khác nhau trong mẫu đang nghiên cứu.

Trong thời gian ủ bệnh và mang virus không triệu chứng, PCR sẽ cho kết quả âm tính, cũng như trong trường hợp không có virus trong cơ thể. Khi bắt đầu phát triển nhiễm trùng nguyên phát và trong giai đoạn đầu, PCR theo thời gian thực có thể cho kết quả dương tính và âm tính, điều này không làm sáng tỏ tình hình theo bất kỳ cách nào.

Tuy nhiên, trong giai đoạn giữa của bệnh (giai đoạn cấp tính), trong quá trình mạn tính hoặc tái hoạt động của vi-rút (đợt bùng phát) và trong trường hợp các dạng không điển hình, phân tích sẽ cho kết quả dương tính. Nếu một người đã bị bệnh trong một thời gian dài và vi-rút trong cơ thể anh ta ở trạng thái không hoạt động, phân tích PCR sẽ cho kết quả âm tính, tức là tiến hành phân tích này trong giai đoạn này cũng không phù hợp, cũng như ở giai đoạn quá sớm của bệnh.

Cần phải nói rằng kết quả chính xác của loại nghiên cứu trong phòng thí nghiệm này chỉ có thể có được trong trường hợp nhiễm trùng ban đầu và không có virion của các loại virus khác.

Bây giờ, liên quan đến xét nghiệm miễn dịch enzyme đối với virus Epstein-Barr. Nó có cùng các yêu cầu. Sự hiện diện của virus herpes loại 5 hoặc 6, bệnh toxoplasma và nhiễm HIV trong cơ thể có thể làm sai lệch kết quả không kém gì thái độ bất cẩn khi phân tích hoặc chất lượng kém của thuốc thử được sử dụng. Trong trường hợp này, có thể cần các nghiên cứu bổ sung, có tính đến các tác nhân gây bệnh có thể xảy ra.

Kết quả xét nghiệm bình thường, cho thấy không có virus trong cơ thể, được coi là kết quả âm tính đối với cả 4 xét nghiệm: IgG EA, IgM VCA, IgG VCA và IgG EBNA. Đúng vậy, mỗi xét nghiệm được thực hiện riêng biệt, vì các kháng nguyên xuất hiện ở các giai đoạn khác nhau của bệnh. Đôi khi chỉ có thể chỉ định các xét nghiệm riêng lẻ, nhưng trong hầu hết các trường hợp, cả 4 xét nghiệm đều phải được thực hiện, nhưng ở các giai đoạn khác nhau của bệnh.

Ví dụ, trong thời gian ủ bệnh, cũng như khi không có nhiễm trùng, không có loại kháng thể nào trong số 4 loại được phát hiện trong máu. Kết quả như vậy không thể được coi là đủ, vì nó không cho phép phân biệt một người mới mắc bệnh lần đầu với một người khỏe mạnh.

Khi bắt đầu phát triển bệnh nguyên phát, chỉ có kháng thể IgM VCA xuất hiện trong máu. Ở giai đoạn đầu của bệnh, IgG VCA sẽ kết hợp với chúng.

Giai đoạn cấp tính của nhiễm trùng nguyên phát tiến triển với sự hình thành của ba loại kháng thể: IgG VCA, IgM VCA và IgG EA, với số lượng kháng thể IgG lớn nhất đối với kháng nguyên vỏ được phát hiện. Thành phần kháng thể tương tự được duy trì trong sáu tháng sau giai đoạn cấp tính của bệnh, nhưng lượng IgM VCA giảm dần về không.

Sáu tháng sau khi phát bệnh, kháng thể IgG EBNA xuất hiện trong máu, trong khi globulin miễn dịch IgG EA ngày càng ít đi và hoàn toàn không có IgM VCA.

Trong các trường hợp bệnh mãn tính hoặc tái hoạt động của vi-rút, có thể có các chỉ số khác nhau. Thông thường, cả 4 loại kháng thể đều được tìm thấy trong máu. Nhưng cũng có thể là các globulin miễn dịch IgM VCA và IgG EBNA không được phát hiện.

Biến chứng của nhiễm trùng do vi-rút thông qua quá trình khối u xảy ra khi không có kháng thể IgM VCA và không phát hiện thấy globulin miễn dịch IgG EBNA trong mọi trường hợp.

Nhưng xét nghiệm miễn dịch enzyme không chỉ xác định sự hiện diện của một số kháng thể nhất định mà còn xác định nồng độ của chúng, cho phép chúng ta đánh giá giai đoạn bệnh lý và hậu quả có thể xảy ra với độ chính xác cao hơn. Không cần phải nói về các số liệu cụ thể ở đây. Xét cho cùng, mỗi phòng xét nghiệm tiến hành phân tích theo một trong những cách có thể, sử dụng nhiều thuốc thử khác nhau, vì vậy kết quả phân tích của các phòng xét nghiệm khác nhau có thể khác nhau ở định dạng kỹ thuật số.

Bệnh nhân cần được cung cấp một biểu mẫu chỉ ra các giá trị ngưỡng (tham chiếu). Nếu kết quả dưới ngưỡng, thì được coi là chỉ số bình thường (âm tính). Nếu số xác định được cao hơn giá trị tham chiếu, thì mọi thứ đều chỉ ra kết quả dương tính, nghĩa là vi-rút đang sống trong cơ thể. Giá trị của giá trị xác định được chỉ ra giai đoạn của bệnh và sự xâm chiếm cơ thể bằng virion EBV, tức là mức độ nghiêm trọng của bệnh lý.

Nếu xét nghiệm ELISA âm tính, điều đó chỉ có nghĩa là người đó chưa từng tiếp xúc với EBV trong quá khứ. Nhưng không thể khẳng định chắc chắn rằng virus hiện có trong cơ thể hay không. Kết quả âm tính có thể do mầm bệnh ủ bệnh trong cơ thể và mang virus không triệu chứng. Đôi khi, để đảm bảo rằng cơ thể không bị virus cư trú, cần phải tiến hành một loạt xét nghiệm thứ hai sau một thời gian.

Nếu kết quả xét nghiệm ELISA virus Epstein-Barr chỉ vượt quá giá trị tham chiếu một chút, kết quả được coi là đáng ngờ. Nguyên nhân thường là giai đoạn đầu của bệnh hoặc sự hiện diện của virion của một loại virus khác trong cơ thể. Trong trường hợp này, sau 2 tuần, nên làm lại xét nghiệm EBV và có thể là các tác nhân gây bệnh khác.

[ 23 ], [ 24 ], [ 25 ], [ 26 ], [ 27 ], [ 28 ], [ 29 ], [ 30 ]

Đối với câu hỏi mất bao lâu để thực hiện xét nghiệm virus Epstein-Barr và khi nào bạn có thể mong đợi kết quả, không có khó khăn cụ thể nào. Trong một phòng xét nghiệm nghiêm túc, được trang bị tốt, bạn sẽ không phải đợi quá 2 ngày sau khi nộp vật liệu sinh học. Trong những tình huống cần phân tích khẩn cấp, câu trả lời có thể nhận được ngay cả sau vài giờ.

Xét nghiệm virus Epstein-Barr nên được thực hiện tại một phòng xét nghiệm đáng tin cậy, nơi có cả thuốc thử chất lượng cao và các chuyên gia có trình độ. Xét nghiệm này tốn kém (và không phải là một số tiền nhỏ, xét nghiệm một loại kháng thể có giá khoảng 150-170 UAH), và tôi không muốn nhận được kết quả sai, rồi sau đó có thể liên hệ lại, nhưng đến một phòng xét nghiệm khác để xét nghiệm lại.

[ 31 ], [ 32 ], [ 33 ], [ 34 ], [ 35 ]