^

Sức khoẻ

Tế bào gốc huyết mạch máu

, Biên tập viên y tế
Đánh giá lần cuối: 23.04.2024
Fact-checked
х

Tất cả nội dung của iLive đều được xem xét về mặt y tế hoặc được kiểm tra thực tế để đảm bảo độ chính xác thực tế nhất có thể.

Chúng tôi có các hướng dẫn tìm nguồn cung ứng nghiêm ngặt và chỉ liên kết đến các trang web truyền thông có uy tín, các tổ chức nghiên cứu học thuật và, bất cứ khi nào có thể, các nghiên cứu đã được xem xét về mặt y tế. Lưu ý rằng các số trong ngoặc đơn ([1], [2], v.v.) là các liên kết có thể nhấp vào các nghiên cứu này.

Nếu bạn cảm thấy rằng bất kỳ nội dung nào của chúng tôi không chính xác, lỗi thời hoặc có thể nghi ngờ, vui lòng chọn nội dung đó và nhấn Ctrl + Enter.

Cordial blood hoạt động như một nguồn tế bào gốc tạo huyết trên tiềm năng tăng sinh và khả năng tái phát của các tế bào máu. Đã nhiều lần cho thấy rằng, vào thời điểm sinh con, máu dây rốn chứa một số lượng rất lớn các tế bào gốc tạo huyết cầu không đạt yêu cầu. Một số tác giả tin rằng lợi ích của việc cấy ghép các tế bào gốc tạo máu của máu rũ là không cần phải tìm kiếm một người hiến tặng tương thích với các kháng nguyên HLA. Theo họ, sự non nớt của nguyên nhân hệ thống miễn dịch của trẻ sơ sinh giảm hoạt động chức năng của các tế bào miễn dịch và, theo đó, thấp hơn so với cấy ghép tủy xương, tỷ lệ nghiêm trọng phản ứng "ghép so với host". Trong tồn ghép tế bào này trong máu dây rốn là không thấp hơn các tế bào tủy xương, ngay cả trong trường hợp sử dụng một số lượng nhỏ hơn của GSK tiêm mỗi 1 kg trọng lượng bệnh nhân. Tuy nhiên, theo quan điểm của chúng tôi, số lượng tối ưu các câu hỏi cấy tế bào máu dây cần thiết cho cấy ghép có hiệu quả trong cơ thể của người nhận, khả năng tương thích miễn dịch của họ, và một số khía cạnh khác của việc cấy ghép tế bào gốc tạo máu của dây rốn máu đòi hỏi phải phân tích nghiêm trọng hơn.

trusted-source[1], [2], [3], [4], [5], [6]

Lấy tế bào gốc tạo huyết máu của máu rốn

Thủ tục để lấy tế bào gốc tạo máu của máu dây rốn đòi hỏi tiêu thụ của nó ngay lập tức sau khi sinh và tách nó từ nhau thai, khi nhau thai là trong tử cung hoặc tử cung cũ, cũng như cho mổ lấy thai, mà còn cựu tử cung. Nó cho thấy rằng trong trường hợp giảm thời gian từ khi sinh ra tới sự tách rời của trẻ sơ sinh ra khỏi nhau thai đến 30 giây, lượng máu dây rốn tăng lên trung bình 25-40 ml. Với thủ tục muộn hơn, sẽ mất một lượng máu tương tự. Người ta xác định rằng việc tách trẻ sớm ra khỏi hậu môn sau khi sinh không gây ra bất kỳ hậu quả tiêu cực nào đối với trẻ sơ sinh.

Viện Nghiên cứu Nga Huyết học và Truyền máu phát triển công nghệ hiệu quả và chi phí thấp cho cả máu dây điện ở dòng sinh lý ((70,2 + 25,8) ml) và mổ lấy thai ((73,4 + 25,1) ml). Một phương pháp để tách máu dây rốn với sản lượng đủ cao của các tế bào đơn nhân và có nhân - (83,1 + 9,6) và (83,4 + 14,1)%, tương ứng. Cải thiện phương pháp bảo quản lạnh của máu dây, đảm bảo an toàn cao của các tế bào đơn nhân và CFU-GM - (96,8 + 5,7) và (89,6 + 22,6)%, tương ứng. Hiệu quả của dây thoát phương pháp lấy mẫu máu bằng cách sử dụng container "Kompoplast-300" (Nga). Hàng rào giả máu tủy thực hiện ngay sau khi sinh và tách nó từ nhau thai, về cách đặt nhau thai trong tử cung hoặc tử cung cũ. Trước khi đâm thủng của tĩnh mạch rốn rốn một lần điều trị bằng 5% cồn iốt, rồi hai lần - 70% ethyl alcohol. Máu chảy qua các ống nối vào bình chứa một cách tự nhiên. Thời gian của hàng rào mất không quá 10 phút. 66 thoát phương pháp thể tích mẫu máu rốn thu trung bình (72 + 28) ml, và số lượng bạch cầu trong mẫu trung bình đầy đủ - (1,1 + 0,6) x x 107. Việc phân tích máu dây rốn cho vô sinh (nhiễm khuẩn, HIV-1 virus viêm gan B và C, giang mai, và nhiễm cytomegalovirus) chỉ trong một mẫu được xác định IgG-kháng thể đối với bệnh viêm gan C. Trong nghiên cứu khác sau khi nhau thai sau khi sinh bề mặt của thai nhi đã được đặt trên một khung đặc biệt downwardly, dây đã được điều trị bằng 5% natri iốt và 75% etyl rượu thứ. Tĩnh mạch rốn với một cây kim để ráo nước từ hệ thống truyền (G16). Máu chảy ra trong thùng máu một cách tự nhiên. Lượng máu được lấy theo cách này trung bình (55 + 25) ml. Giấy G. Kogler et al (1996) dây máu lấy cách khép kín và thu được khối lượng lớn máu - trung bình (79 + 26) ml. Các tác giả lưu ý rằng trong số 574 dây mẫu máu chứa ít hơn 40 ml máu, mà không cho phép sử dụng chúng cho việc cấy ghép khoảng 7%. K. Isoyama et al (1996), lấy máu tủy bởi exfusion tích cực sử dụng ống tiêm, nhận được trung bình 69,1 ml máu (lượng máu dây dao động 15-135 ml). Cuối cùng, A. Abdel-Mageed PI cộng tác viên (1997) bởi punovinnoy tĩnh mạch đặt ống thông đã thu được ở mức trung bình 94 ml máu dây (56-143 ml).

Để giảm nguy cơ nhiễm trùng do thầy thuốc và ô nhiễm bởi chất tiết của mẹ phát triển đóng bộ sưu tập hệ thống máu dựa trên hệ thống transfuzioinoy sử dụng rộng rãi Baxter Healthcare Corp, Deerfield, IL (Mỹ), có chứa 62,5 ml CPDA (citrate-phosphate dextrose với adenine) như thuốc chống đông. Công nghệ sản xuất vật liệu là hết sức quan trọng cho việc chuẩn bị của một mẫu chất lượng tương ứng với số lượng nội dung và độ tinh khiết của dịch treo tế bào. Trong số các phương pháp hiện có của bộ sưu tập máu tủy, kotoryeuslovno phân thành sở thích hệ thống sleduetotdavat đóng cửa, bán mở và mở đầu tiên, như trong một hệ thống khép kín làm giảm đáng kể nguy cơ nhiễm khuẩn của vật liệu, cũng như ô nhiễm của dịch treo tế bào của tế bào mẹ.

A. Nagler và các đồng tác giả (1998) đã tiến hành một phân tích so sánh hiệu quả của cả ba hệ thống lấy mẫu máu dây rốn. Trong phiên bản đầu tiên, thủ tục được thực hiện trong một hệ thống khép kín bằng cách truyền máu trực tiếp vào trong bình chứa. Trong các biến thể thứ hai, dây rốn được thu bằng phương pháp bơm máu hoạt động của ống tiêm1 với rửa thêm tĩnh mạch nhau thai và đồng thời rút máu vào trong bình chứa (phương pháp mở). Trong các biến thể thứ ba, máu đã được thu hồi trong một hệ thống bán mở bằng cách tích cực chiết xuất nó bằng ống tiêm và rửa qua các động mạch của dây rốn cùng với truyền dịch vào container. Trong phiên bản đầu tiên, các tác giả nhận được máu rốn trong thể tích (76,4 + 32,1) ml với số lượng bạch cầu (10,5 + 3,6) x 10 6 trên 1 ml máu. Trong biến thể thứ hai, các chỉ số tương ứng là (174,4 + 42,8) ml và (8,8 + 3,4) x 10 6 / ml; ở phần ba - (173,7 + 41,3) ml và (9,3 + 3,8) x 10 6 / ml. Nhiễm trùng máu rốn thường xuyên nhất được ghi nhận khi sử dụng hệ thống hở. Một sự tương quan trực tiếp giữa khối lượng nhau thai và khối lượng của máu được chiết xuất được thiết lập - với khối lượng nhau thai tăng lên, lượng máu thu thập tăng lên.

Sau khi lấy mẫu máu rốn, bước tách được thực hiện sau - cách ly các tế bào đơn hạt nhân và thanh lọc tế bào khỏi hồng cầu. Trong các điều kiện thí nghiệm, các tế bào nhân tạo được phân lập bằng phương pháp lắng đọng của chúng với methylcellulose trong quá trình phân ly của hồng cầu amoni bằng clorua. Tuy nhiên, đối với các mục đích lâm sàng, không nên sử dụng methylcellulose vì sự mất mát của tế bào gốc tạo máu đạt 50-90%. Lysing tế bào máu đỏ trong mối liên hệ với khối lượng lớn của các giải pháp làm việc tại phòng khám cũng khó thực hiện, mặc dù tỷ lệ tách theo cách này có nhân tế bào với các kiểu hình của CD34 +, và tế bào nguyên bản các chức năng CFU-GM và CFU-GEMM cao hơn đáng kể. Một đại lý mới cho sự cô lập các tế bào đơn nhân trong mật độ mật độ người mua giải quyết mật độ (BDS72) đã được báo cáo. Chất này có các thông số sinh lý sau: pH - 7,4, độ thẩm thấu - 280 mg / kg, mật độ 1,0720 g / ml. Theo các tác giả, với sự giúp đỡ của nó, có thể cô lập tới 100% các tế bào CD34 dương tính và loại bỏ 98% hồng cầu. Tuy nhiên, phòng khám chưa áp dụng BDS72.

Các phương pháp tách thử nghiệm tế bào có nhân từ máu dây rốn thường được sử dụng một giải pháp HES 10% hoặc 3% dung dịch gelatin. Hiệu quả của sự kết tủa của hồng cầu và cô lập các tế bào có nhân trong cả hai trường hợp là xấp xỉ bằng nhau. Tuy nhiên, trong trường hợp sử dụng như một tác nhân gelatin sedimenting thể để có được một số lượng hơi lớn của CFU-GM, so với khi sử dụng HES. Người ta cho rằng sự khác biệt về hiệu quả phục hồi CFU-GM tốc độ không đồng đều do sự lắng đọng của các phân số cá nhân hoặc các phân tử HES có nhân khả năng tế bào hấp thụ trên thụ thể bề mặt tế bào tạo máu và do đó ngăn chặn sự nhạy cảm của mình để thuộc địa kích thích tố, được sử dụng khi nuôi CFU-GM in vitro. Tuy nhiên, cả hai sedimenter thể cũng phù hợp với sự cô lập của các tế bào có nhân trong việc tạo ra của các ngân hàng máu dây quy mô lớn.

Các phương pháp tách và bảo quản lạnh máu rốn trên nguyên tắc không khác với những phương pháp được sử dụng trong công việc với các tế bào gốc tạo máu máu ngoại trú và tủy xương của người hiến tạng. Nhưng khi chuẩn bị một số lượng lớn các mẫu máu rốn cho các ngân hàng của mình, các phương pháp ly thân trước hết phải là chi phí thấp. Do đó, bây giờ, không may, đối với các nhu cầu lâm sàng đã được sử dụng các phương pháp cách ly thường xuyên và bảo quản lạnh của tế bào máu rốn được sử dụng, và các phương pháp hiệu quả hơn nhưng hiệu quả về mặt tài chính vẫn còn rất nhiều thí nghiệm.

Nói chung, các tiêu chí để ước lượng số lượng tế bào máu và các yêu cầu để nghiên cứu các mẫu máu dây rốn đã được thiết lập để xác định các tác nhân gây bệnh. Để đảm bảo cấy ghép các tế bào máu hematopoietic, tất cả các mẫu máu phải được kiểm tra chủ yếu cho các bệnh nhiễm trùng máu và bệnh di truyền. Một số tác giả đề nghị phương pháp đặc biệt bổ sung của nghiên cứu về máu dây rốn với mục đích chẩn đoán bệnh di truyền như thalassemia và hồng cầu liềm thiếu máu, thiếu deaminase adenosine, agammaglobulinemia Bruton, bệnh Harlera và đánh bạc.

Theo khuyến nghị Ticheli L. Et al (1998), trong mỗi mẫu máu dây rốn là cần thiết để xác định số lượng tế bào có nhân, các tế bào SB34 dương và CFU-GM, mang HLA-gõ để xác định nhóm máu ABO và Rh thành viên của nó. Bên cạnh đó, hạt giống được thực hiện vi khuẩn học, kiểm tra huyết thanh học HIV và nhiễm CMV, HBsAg, viêm gan C, HTLY-I và HTLV-II (T-cell leukemia, con người), giang mai, toxoplasmosis. Đáp polymerase chuỗi phản ứng với cytomegalovirus và nhiễm HIV là bắt buộc.

Chính quy trình để lấy máu dây rốn nên được tiến hành theo đúng các nguyên tắc về đạo đức sinh học. Trước khi bắt đầu thu thập máu, cần phải có sự đồng ý của người phụ nữ mang thai để thực hiện. Cuộc nói chuyện sơ bộ với người phụ nữ mang thai để có được sự chấp thuận để thực hiện tất cả các thao tác, vì exfusion máu điền và các văn bản kết thúc được thực hiện chỉ bởi các chuyên gia sức khỏe. Trong bất kỳ trường hợp không thể chấp nhận thực hiện bất kỳ của các thủ tục này bằng cách nhân với sinh học, hóa chất, dược phẩm và giáo dục phi y tế khác, theo quan điểm của vi phạm các chỉ tiêu thành lập đạo đức sinh học và nhân quyền. Đối với các xét nghiệm dương tính với hãng HBsAg, kháng thể chống lại tác nhân gây bệnh viêm gan C, HIV và giang mai trong máu dây không được thực hiện, và các mẫu máu thu thập được đã bỏ đi và bị phá hủy. Cần lưu ý rằng việc vận chuyển các bệnh nhiễm trùng tiềm ẩn ở trẻ sơ sinh là hiếm hơn nhiều so với ở người lớn, do đó khả năng chuyển giao và phát triển của biến chứng nhiễm trùng của việc truyền máu của các tế bào máu dây đường máu thấp hơn trong trường hợp ghép tủy xương từ các nhà tài trợ lớn đáng kể.

Một điểm quan trọng trong việc áp dụng máu rũ trong phòng khám là đánh giá việc cấy ghép, dựa trên việc xác định số lượng tế bào gốc tạo máu trong mẫu máu rủ và liều lượng tế bào cần thiết cho việc cấy ghép. Các tiêu chuẩn cho số lượng tối ưu của tế bào máu rốn cần thiết cho việc cấy ghép vẫn chưa được phát triển. Không có điểm nhìn chung được chấp nhận ngay cả trên các tham số thông thường như số tế bào CD34 dương tính và CFU-GM. Một số tác giả đánh giá tiềm năng của các tế bào máu bằng cách phân tích của các nền văn hóa lâu dài với xác định hàm lượng của các đơn vị thuộc địa hình thành chung cho bạch cầu hạt, hồng cầu, bạch cầu đơn nhân và megakaryocytes - CFU-GEMM.

Tuy nhiên, trong các thiết lập lâm sàng, đánh giá tiêu chuẩn của việc cấy máu rốn thường chỉ bao gồm việc xác định số lượng các tế bào nucleated hoặc đơn hạt nhân.

Lưu trữ các tế bào gốc tạo máu của máu rốn

Một số vấn đề tồn tại trong công nghệ lưu trữ các tế bào máu hematopoietic máu. Khi bảo quản lạnh của tế bào gốc tạo máu để đạt được chế độ đóng băng tối ưu của họ phải hạn chế tối đa lượng máu dây rốn và tế bào máu đỏ trước đó loại bỏ để tránh tán huyết và nguy cơ phản ứng không tương thích của kháng nguyên hồng cầu (ABO, Rh). Với những mục đích này, các phương pháp khác nhau để cô lập các tế bào nhân là phù hợp. Trong những năm đầu 90 của thế kỷ trước các phương pháp được sử dụng rộng rãi nhất của tách các tế bào có nhân trong một gradient mật độ dựa trên Ficoll với mật độ 1,077 g / ml, hoặc thấm với mật độ 1.080 g / ml. Tách dây máu bởi mật độ dốc cho phép lựa chọn các tế bào đơn nhân chủ yếu nhưng dẫn đến thiệt hại đáng kể của các tế bào tạo máu - lên đến 30-50%.

Hiệu quả lắng cặn của tinh bột hydroxyethyl trong quá trình cách ly tế bào máu rốn được ước tính bằng nhiều cách khác nhau. Một số tác giả cho thấy chất lượng phân tách thấp bằng cách sử dụng phương pháp này, trong khi các nhà nghiên cứu khác, trái lại, trong số tất cả các phương pháp có thể thích phân bổ máu dây rốn HSC một cách chính xác bằng cách sử dụng dung dịch hydroxyethyl tinh bột 6%. Điều này làm nổi bật hiệu quả cao của lắng cặn các tế bào máu, theo một số dữ liệu, đạt từ 84% đến 90%.

Những người ủng hộ một quan điểm khác cho rằng gần như tất cả các quá trình phân đoạn liên quan đến tế bào tổn thất yadrosoderzhashih lớn và cung cấp để thực hiện tách bằng cách ly tâm, tách máu dây thành 3 phần: hồng cầu, bạch cầu và vòng plasma. Tách các tế bào theo cách này, các nhà phát minh đã tìm thấy rằng nội dung của các tế bào đơn nhân của các tế bào tạo máu sớm và các tế bào với CD34 + immunophenotype cuối cùng tương ứng là 90, 88 và 100% so với mức ban đầu. Số lượng tương tự của sự phát triển tinh khiết trong phương pháp này của các tế bào máu dây rốn thu được bằng cách nghiên cứu khác: sau khi lắng có nhân phân bổ 92%, 98% - đơn nhân, 96% - các tế bào CD34 dương tính và 106% các đơn vị thuộc địa hình thành.

Cuối những năm 1990, gelatin đã được sử dụng rộng rãi như là một chất trầm tích. Trong thực hành lâm sàng, sử dụng tế bào gốc tạo máu gelatin được phân lập từ máu dây rốn từ năm 1994. Khi sử dụng một giải pháp 3% của các tế bào có nhân gelatin hiệu quả phục hồi đạt 88-94%. Sử dụng rộng rãi trong việc tạo ra gelatin ngân hàng máu dây rốn đã khẳng định lợi thế của mình trên các phương tiện khác của trầm tích. Phân tích so sánh tất cả các phương pháp trên của cô lập các tế bào có nhân trong điều khoản sử dụng tuần tự của họ trong mỗi mẫu máu dây thử nghiệm cho thấy rằng sedimenter-out tế bào đơn nhân tối ưu với các kiểu hình CD34 + / CD45 +, cũng như số lượng CFU-GM và CFU-GEMM là 3% gelatin. Nó được chứng minh là đáng kể phương pháp kém hiệu quả sử dụng Ficoll mật độ gradient, và việc sử dụng methyl cellulose và hydroxyethyl starch trong đó mất tế bào tạo máu đạt 60%.

Việc mở rộng khối lượng ghép tế bào gốc của máu dây rốn không chỉ liên quan đến việc phát triển các phương pháp sản xuất mà còn lưu trữ. Có rất nhiều vấn đề liên quan trực tiếp đến việc chuẩn bị máu dây rốn để lưu trữ lâu dài và lựa chọn công nghệ bảo quản lạnh tối ưu cho các mẫu của nó. Trong số đó có các vấn đề về tính khả thi của việc thực hiện các thủ tục ly thân, sử dụng các phương tiện bảo quản lạnh khác nhau và sử dụng các phương pháp để chuẩn bị các tế bào đã tan trong quá trình cấy ghép. Vận chuyển các mẫu máu từ máu bản địa thường được thực hiện từ các vùng xa trung tâm huyết học. Liên quan đến vấn đề này, vấn đề phát sinh trong thời gian cho phép lưu trữ máu dây rốn từ khi nhận được đến khi bắt đầu bảo quản lạnh, điều này đặc biệt quan trọng trong sự phát triển của các ngân hàng máu dây rốn.

Nghiên cứu về các hoạt động chức năng của các tế bào máu dây máu sau khi lưu trữ lâu dài (lên đến 12 năm) trong nitơ lỏng tiết lộ rằng khoảng 95% các tế bào máu trong thời gian này không bị mất khả năng tăng sinh cao của họ. Các giấy Yurasova S. Et al (1997) đã chứng minh rằng máu dây bảo quản ở nhiệt độ phòng (22 ° C) hoặc ở 4 ° C trong 24 đến 48 giờ không làm giảm đáng kể khả năng tồn tại của các tế bào tạo máu rằng mức độ ban đầu là phù hợp 92 và 88%. Tuy nhiên, nếu thời gian bảo quản được kéo dài đến ba ngày, số lượng các tế bào nhân tạo trong máu dây rốn sẽ giảm đáng kể. Cùng lúc đó, các nghiên cứu khác phát hiện ra rằng quá trình bảo quản trong 2-3 ngày ở nhiệt độ 22 ° C hoặc 4 chủ yếu ảnh hưởng đến tính khả thi của bạch cầu hạt trưởng thành, nhưng không phải tế bào tạo máu.

Sự vững bền của máu tủy tế bào gốc tạo máu có thể có một tác động tiêu cực của các thành phần hệ thống vào bộ sưu tập của mình. Phân tích về tác động của thuốc chống đông máu khác nhau, trong đó cơ chế hoạt động là do ràng buộc của các ion canxi (ACD, EDTA, XAPD-1) cho tế bào tiền thân tạo máu trong điều kiện bảo quản máu cuống rốn từ 24 đến 72 giờ tiết lộ tác động tiêu cực của họ về khả năng tồn tại của các tế bào có nhân. Trên tinh thần đó, các tác giả khuyến cáo sử dụng PBS (phosphate dung dịch đệm) với việc bổ sung heparin tự nhiên mà không cần bảo quản ở nồng độ 20 U / ml, trong đó, theo ý kiến của họ, làm cho nó có thể tăng thời gian lưu trữ không phân đoạn máu dây lên đến 72 giờ và tiết kiệm các hoạt động chức năng của các đơn vị thuộc địa hình thành. Tuy nhiên, trong việc nghiên cứu bảo tồn CFU-GM và CFU-G chỉ ra rằng thời gian lưu trữ máu cuống rốn trước khi bảo quản lạnh không nên vượt quá chín tiếng đồng hồ. Rõ ràng, trong trường hợp này nên hành động theo nguyên tắc nếu có dữ liệu mâu thuẫn nên sử dụng tối thiểu nên thời gian bảo quản máu cuống rốn và bắt đầu một tế bào đông lạnh cách ly lập trình càng nhanh càng tốt.

Khi đóng băng tế bào gốc máu của máu rốn, một dung dịch DMSO 10% thường được sử dụng làm chất bảo vệ lạnh. Tuy nhiên, ngoài hiệu ứng bảo vệ lạnh, dimethylsulfoxide trong nồng độ này có tác dụng gây độc trực tiếp, ngay cả trong điều kiện tiếp xúc tối thiểu với các tế bào tạo máu trong máu rốn. Để giảm tác dụng gây độc tế bào của DMSO, nhiệt độ tiếp xúc bằng không, tăng tốc độ của tất cả các thao tác và giặt lại lặp lại sau khi làm tan băng rốn được áp dụng.

Viện Huyết học và Truyền sinh học của Học viện Khoa học Y học Ukraine đã và đang phát triển một hướng khoa học từ năm 1995, với mục tiêu nghiên cứu máu dây rốn như là một nguồn thay thế các tế bào máu nguyên phát. Đặc biệt, các công nghệ mới để bảo tồn lạnh cryopoietic ở nhiệt độ thấp của máu dây rốn không phân đoạn và phân đoạn được phát triển. Là chất bảo vệ lạnh, sử dụng polyvinylpyrolidone y tế có trọng lượng phân tử thấp. Phương pháp bảo quản lạnh máu dây rốn không phân đoạn được dựa trên công nghệ ban đầu của việc chuẩn bị trước các tế bào để đóng băng và kỹ thuật điều trị đặc biệt tế bào huyền phù ngay trước khi cấy ghép.

Một trong những yếu tố quan trọng nhất ảnh hưởng đến mức độ hoạt động chức năng của các tế bào gốc máu bị đông lạnh bảo quản là tỷ lệ làm mát của tế bào đình chỉ, đặc biệt là trong giai đoạn kết tinh. Cách tiếp cận phần mềm để giải quyết vấn đề tốc độ và thời gian đóng băng tạo cơ hội tuyệt vời cho việc tạo ra phương pháp bảo quản lạnh đơn giản và có hiệu quả cao mà không cần rửa tế bào khỏi chất bảo vệ lạnh trước khi cấy ghép.

Các giai đoạn đóng băng và tan băng ngay lập tức nguy hiểm nhất đối với khả năng tồn tại của tế bào trong quá trình chuẩn bị. Khi đóng băng các tế bào máu, một phần đáng kể trong số chúng có thể bị phá hủy ở thời điểm chuyển tiếp của môi trường giữa tế bào từ lỏng đến pha rắn pha. Để giảm tỷ lệ chết của tế bào, các chất chống ăn mòn được sử dụng, cơ chế tác dụng và hiệu quả bảo vệ lạnh đã được đề cập đầy đủ trong các tài liệu khoa học.

Một hứa hẹn Kỹ thuật hướng Tối ưu hóa bảo quản lạnh của tủy xương và tế bào máu dây rốn là kết hợp trong cùng một giải pháp với nồng độ thấp của chất bảo quản lạnh với các cơ chế khác nhau của hành động, ví dụ, tác động lên mức nội bào của DMSO và hydroxyethyl starch hay albumin hữu hiệu lực thi hành kèm theo ngoại bào.

Đối với bảo quản lạnh của các tế bào máu dây được truyền thống sử dụng 20% dung dịch DMSO được vĩnh viễn một cách máy móc khuấy trong một bồn tắm nước đá, đã từ từ đổ vào các dịch treo tế bào để đạt được bình đẳng (1: 1) tỷ lệ khối lượng của dịch treo tế bào và các chất bảo vệ lạnh. Nồng độ cuối cùng của dimethyl sulphoxide là 10%. Các dịch treo tế bào được làm lạnh trên một chương trình với tốc độ krioustanovke HS / phút đến -40 ° C sau đó tốc độ làm mát được tăng lên đến 10 ° C / phút. Sau khi đạt đến -100 ° C, thùng chứa với huyền phù tế bào được đặt trong nitơ lỏng (-196 ° C). Với phương pháp bảo quản lạnh này, sự an toàn của các tế bào đơn hạt hoạt động sau khi tan hết đạt 85% so với mức ban đầu.

Sửa đổi phương pháp bảo quản lạnh nhằm mục đích làm giảm nồng độ DMSO bằng cách bổ sung tinh bột hydroxyetyl (nồng độ cuối cùng của dimethyl sulfoxide và hydroxyethyl tinh bột lần lượt là 5% và 6%). Hiệu quả cao của sự kết hợp các chất bảo vệ lạnh này được quan sát thấy khi sự đình chỉ của các tế bào tủy là đông lạnh, không có bảo vệ tế bào ít hơn so với một giải pháp duy nhất 10% dimethylsulfoxide. Số tế bào nhân có khả năng sinh trưởng đạt 96,7% so với mức cơ sở, và hoạt động chức năng của chúng, được ước lượng bởi số lượng CFU-GM, là 81,8%.

Khi sử dụng giải pháp sulfoxide dimethyl ở nồng độ khác nhau, từ 5 đến 10% kết hợp với 4% hydroxyethyl starch (nồng độ cuối cùng) phát hiện ra rằng việc bảo tồn của các tế bào CD34 dương tính trong các phạm vi này Dimethylsulfoxide thực tế không thay đổi. Đồng thời trong điều kiện của việc giảm nồng độ của DMSO 5-2,5% được quan sát cái chết hàng loạt của các tế bào máu dây - số đơn vị tế bào có thể được giảm 85,4-12,2%. Các tác giả khác cũng kết luận rằng đó là 5 và 10% dung dịch dimethyl sulfoxide (trong hiện thân bản quyền - kết hợp với huyết thanh tự thân) với hiệu quả tối đa cung cấp cytoprotection trong bảo quản lạnh của HSC máu dây rốn. Bên cạnh đó, tuần tự an toàn cao đông lạnh và tế bào tan được đánh dấu trong trường hợp sự kết hợp của 5 hoặc 10% DMSO 4% dung dịch hydroxyethyl starch, đặc biệt là với một tốc độ làm mát kiểm soát của TOS / phút. Trong một bài báo sử dụng giải pháp cryoprotective bao gồm ba thành phần đã - DMSO, albumin con người tinh khiết và RPMI vừa theo tỉ lệ 1: 4: 5, được bổ sung vào hệ thống treo tế bào lên đến một tỷ lệ thể tích tương đương (nồng độ DMSO cuối cùng là 5%). Sau khi tan băng trong bể nước ở nhiệt độ + 4 ° C, độ an toàn của CFU-GM vượt quá 94%.

Một số tác giả gợi ý sử dụng máu dây rốn không phân đoạn để bảo quản lạnh, vì một lượng đáng kể các tế bào tạo máu được mất trong quá trình loại bỏ các tế bào hồng cầu. Trong phương án này, một giải pháp 10% dimethylsulfoxide được sử dụng để bảo vệ các tế bào đơn nhân khỏi những tác động gây hại của quá trình kết tinh. Chế độ đông lạnh được thực hiện với tốc độ làm mát không đổi từ HS / phút đến -80 ° C, sau đó việc ngưng các tế bào máu rốn được ngâm trong ni tơ lỏng. Với phương pháp đông lạnh này, sự phân ly một phần của hồng cầu xảy ra, do đó các mẫu máu không cần phân đoạn. Sau khi tan băng, tế bào huyền phù được rửa từ hemoglobin tự do và dimethylsulfoxide trong dung dịch albumin người hoặc trong huyết thanh tự thân của bệnh nhân và được sử dụng để cấy ghép.

Bảo tồn các tế bào tiền thân tạo máu sau khi rã đông máu tủy không phân đoạn là thực sự cao hơn so với phân đoạn, nhưng trong mối liên hệ với krioustoychivostyu của các tế bào máu đỏ có thể gây ra vấn đề nghiêm trọng do hậu quả của hậu truyền truyền của các tế bào màu đỏ ABO không tương thích. Ngoài ra, lượng lưu trữ không phân đoạn máu tăng đáng kể. Từ một điểm lâm sàng của xem, vẫn còn tốt hơn nữa bảo quản lạnh trước đây bị cô lập và tinh chế từ các phần phân đoạn khác của tế bào của các tế bào tạo máu máu dây rốn.

Đặc biệt, một phương pháp bảo quản lạnh là các tế bào máu dây phân đoạn cho phép loại bỏ tế bào hồng cầu để chuẩn bị cho đóng băng, trong đó sử dụng một giải pháp 6% hydroxyethyl starch trong các giải pháp phần plazmozameshchath "Stabizol". Sau khi tan băng, tế bào huyền phù do đó thu được đã sẵn sàng để sử dụng lâm sàng mà không cần thao tác thêm.

Như vậy, hiện nay, có rất nhiều cách khá hiệu quả để bảo quản lạnh máu rốn. Sự khác biệt chính là các mẫu máu đông lạnh không phân đoạn hoặc phải phân chia thành các phân đoạn tế bào trong giai đoạn chuẩn bị và các tế bào nucleated thu hoạch mà không có phụ gia hồng cầu.

Cấy ghép tế bào gốc bạch huyết của máu rốn

Vào cuối những năm 80 - đầu những năm 90 của thế kỷ trước, người ta nhận thấy rằng máu rốn cung cấp bào thai trong thời kỳ mang thai được đặc trưng bởi một nội dung cao của các tế bào gốc tạo huyết. Tính đơn giản tương đối của việc lấy tế bào máu rốn và sự vắng mặt của các vấn đề đạo đức rõ ràng thúc đẩy việc sử dụng các tế bào gốc máu dây rốn trong y học thực tiễn. Cấy ghép dây máu thành công đầu tiên cho trẻ bị thiếu máu Fanconi là điểm khởi đầu cho việc mở rộng lượng tế bào gốc rễ và tạo ra một hệ thống cung cấp ngân hàng. Trong hệ thống ngân hàng máu dây rốn toàn cầu, lớn nhất là Trung tâm Máu trong Cơ thể New York, nằm trong bảng cân đối của Viện Y tế Quốc gia. Số lượng mẫu máu lưu trữ trong ngân hàng này đang đến gần 20 LLC. Số người nhận (chủ yếu là trẻ em) cũng đang tăng lên, và việc cấy ghép thành công đã được thực hiện. Theo Bộ Y tế Hoa Kỳ, giai đoạn tái phát sau cấy ghép của người nhận HSC máu đã vượt quá 10 năm.

Đây không phải là đáng ngạc nhiên, như nhiều nghiên cứu về tiềm năng tạo máu của máu dây rốn đã chỉ ra rằng số lượng và chất lượng của các tế bào gốc đầu tiên không chỉ là không thua kém một người trưởng thành tủy xương của con người, mà còn bởi một số biện pháp vượt qua nó. Một tiềm năng tăng sinh cao hơn của tế bào gốc máu dây gây ra các tính năng di động tín hiệu phát triển, sự có mặt của các thụ thể trên HSCs đến yếu tố tăng trưởng cụ thể, khả năng của các tế bào máu dây để autocrine sản xuất yếu tố tăng trưởng, kích thước lớn và chiều dài của telomere.

Do đó, các tính năng của bộ gen và kiểu hình của tế bào gốc tạo máu của tủy định trước máu chất lượng cấy ghép tiềm năng phục hồi máu hiến cao ở người nhận.

Ưu điểm của tế bào gốc tạo máu của máu rốn

Trong số các lợi ích thực sự của việc sử dụng tế bào gốc máu dây máu để cấy ghép trên các nguồn khác của các tế bào tạo máu cần lưu ý hầu như không có rủi ro cho sức khỏe của nhà tài trợ (nếu không được coi là một nhau thai như vậy), trong khi loại bỏ sự cần thiết của gây mê toàn thân. Việc sử dụng máu rốn mở rộng khả năng cấy ghép tế bào do cấy ghép tương thích một phần trong hệ thống HLA (không tương thích từ một đến ba kháng nguyên). Kỹ thuật lưu trữ lâu dài của các tế bào máu dây máu trong tình trạng đông lạnh, làm tăng khả năng thu thập hiếm HLA-type và giảm thời gian tìm kiếm HLA kết hợp cấy ghép đồng loại. Đồng thời, nguy cơ phát triển một số nhiễm trùng tiềm ẩn truyền qua đường truyền giảm đáng kể. Ngoài ra, có một loại hình bảo hiểm sinh học rẻ tiền có liên quan đến khả năng sử dụng các tế bào máu dây rốn để cấy ghép autologous.

Tuy nhiên, do khối lượng nhỏ máu có thể được thu thập từ nhau thai (trung bình không quá 100 ml) để trở nên nổi bật vấn đề của việc thu thập số lượng tối đa có thể của máu từ tĩnh mạch dây rốn theo đúng các điều kiện rủi ro tối thiểu ô nhiễm vi khuẩn trong rốn mẫu có nguồn gốc máu dây rốn.

Các tế bào tạo máu nguyên thủy từ máu dây rốn thường được xác định bởi sự hiện diện trên CD34 glikofosfoproteina bề mặt của chúng, và trên cơ sở tính chất chức năng của họ bằng cách kiểm tra các xét nghiệm hoặc thuộc địa hình clonogenic in vitro. Phân tích so sánh cho thấy, hàm lượng tối đa máu dây rốn và tủy xương của các tế bào đơn nhân CD34 dương tính trong phần lần lượt là 1,6 và 5,0%, mức tối đa của đơn vị hình thành khuẩn lạc trong một quần thể của các tế bào CD34 + - 80 và 25%, tổng hiệu quả nhân bản của CD34 + -cells - 88 và 58%, thuộc địa tối đa hình thành các tế bào có tiềm năng tăng sinh cao (HPP-CFC trong -populyatsii CD34 +) - 50 và 6,5%. Cũng cần nói thêm rằng hiệu quả nhân bản của CD34 + CD38 tế bào và khả năng đáp ứng với kích thích cytokine cũng cao hơn trong các tế bào gốc tạo máu của máu dây rốn.

Kết hợp kháng nguyên kiểu hình Thy-1, CD34 và CD45RA khẳng định dung lượng cao tăng sinh của các tế bào tạo máu huyết tủy, và biểu hiện của ba kháng nguyên trên bề mặt của các tế bào máu dây chỉ ra rằng họ thuộc về các tế bào gốc. Ngoài ra, người ta đã xác định rằng máu dây rốn chứa các tế bào có kiểu hình CD34 + không có các điểm phân biệt tuyến tính. Mức trong máu rốn của các tiểu nhóm tế bào có cấu hình kiểu hình của CD34 + / Lin chiếm khoảng 1% tổng số tế bào CD34 dương tính. Tế bào tiền thân tạo máu làm phát sinh các dây máu như một dòng tế bào bạch huyết, và một số tuyến tính đa năng biệt hóa tế bào dòng tủy, mà cũng chỉ ra rằng họ thuộc về các tế bào gốc.

Như đã đề cập, sự khác biệt chủ yếu giữa các tủy xương và máu dây rốn là trong một số tiền thu được từ một thủ tục lấy mẫu sử dụng cho việc cấy ghép tế bào tạo máu. Khi tủy xương mất ghép khối lượng tế bào trong quá trình tách, bảo quản lạnh, tan băng và thử nghiệm được cho phép trong khoảng từ 40-50%, các tế bào máu dây thiệt hại như vậy là rất đáng kể, kể từ khi sử dụng đủ số ghép HSC có thể đứng vững. Theo G. Kogler et al (1998), cho việc cấy ghép tế bào trong trọng lượng cơ thể người nhận 10 kg ghép tiềm năng (tổng số của các mẫu máu dây thu - 2098) có thể là tất cả các mẫu máu dây, trọng lượng cơ thể 35 kg - 67%, và chỉ 25% mẫu sẽ có thể cung cấp cấy ghép có hiệu quả ở bệnh nhân có trọng lượng cơ thể 50-70 kg. Tình trạng lâm sàng này cho thấy cần phải tối ưu hóa và nâng cao hiệu quả của các phương pháp lấy mẫu, sinh sản và lưu trữ các tế bào máu rốn hiện có. Do đó, các vấn đề về tiêu chuẩn hóa các phương pháp lấy mẫu, thử nghiệm, tách và bảo quản lạnh của máu dây bây giờ thảo luận rộng rãi trong các tài liệu cho việc tạo ra các ngân hàng máu, việc sử dụng nó trong các phòng khám, cũng như thiết lập các điều kiện và nhu cầu lưu trữ của tế bào gốc tạo máu của máu dây rốn.

trusted-source[7], [8], [9],

Việc sử dụng các tế bào gốc tạo máu của máu dây rốn trong y học

Thông thường, có thể phân lập được tới 10 6 tế bào gốc huyết cầu từ máu rốn , ít khi hơn. Liên quan đến điều này, cho đến ngày hôm nay, vẫn còn câu hỏi về sự đầy đủ của rất nhiều máu tế bào máu tạo máu để khôi phục lại sự tạo huyết của người lớn. Ý kiến về vấn đề này đã được chia ra. Một số nhà nghiên cứu tin rằng số tiền này là đủ cho trẻ em cấy ghép, nhưng quá nhỏ để ghép con người trưởng thành, mà chính quyền là tối ưu (7-10) × 10 6 tế bào CD34 dương tính trên 1 kg trọng lượng cơ thể - trung bình 7 × 10 8 mỗi lần cấy ghép. Từ những tính toán này, nó cho thấy rằng một trong những mẫu dây rốn chứa 700 lần tế bào gốc tạo máu ít hơn là cần thiết cho một ca ghép với một bệnh nhân người lớn. Tuy nhiên, đánh giá định lượng như vậy được thực hiện bởi sự tương tự với số lượng tế bào tủy xương truyền và hoàn toàn bỏ qua những đặc điểm phát triển của tạo máu.

Đặc biệt, nó bỏ qua một thực tế khả năng tăng sinh cao hơn của tế bào gốc tạo máu của máu dây so với tế bào tiền thân tạo máu của tủy xương. Kết quả nghiên cứu về tiềm năng hình thành khuẩn lạc trong ống nghiệm cho thấy một liều máu dây rốn có thể cung cấp sự tái tạo máu của người lớn. Mặt khác, chúng ta không nên quên rằng số lượng HSCs giảm ngay cả trong quá trình phát triển phôi: nội dung của các tế bào CD34 dương tính trong máu dây rốn được giảm tuyến tính 5 lần trong một khoảng thời gian 20 tuần (máu để nghiên cứu đã thu được trong trường hợp chấm dứt sớm của thai kỳ) đến 40 tuần của thai kỳ (giai đoạn sinh sản sinh lý), đi kèm với sự tăng lên song song, vĩnh viễn trong biểu hiện các dấu hiệu phân tách tuyến tính.

Do thiếu một phương pháp tiếp cận chuẩn hóa để định lượng các tế bào tiền thân trong các mẫu máu rốn, nên tranh luận về liều lượng tối ưu của tế bào gốc máu tạo huyết. Một số nhà nghiên cứu tin rằng số lượng các tế bào nucleated và các tế bào đơn nhân, được tính toán lại cho trọng lượng cơ thể của người nhận, đó là liều của chúng, có thể được sử dụng làm tiêu chí lựa chọn các mẫu dây rốn. Một số tác giả tin rằng ngưỡng định lượng tối thiểu của các tế bào CD34 +, ngay cả khi tiến hành cấy ghép autologous của HSC, là 2 x 10 6 / kg. Việc tăng liều của các tế bào tạo máu đến 5 × 10 6 tế bào / kg (tổng cộng 2.5) đã cung cấp một phù hợp hơn cho giai đoạn sau cấy sớm, làm giảm tỷ lệ mắc các biến chứng nhiễm trùng và rút ngắn thời gian điều trị kháng sinh phòng ngừa.

Theo E. Gluckman et al (1998) ở khoa huyết học cho việc cấy ghép thành công của các tế bào máu dây rốn nó là sự ra đời của ít nhất 3,7 × 10 7 tế bào có nhân mỗi 1 kg trọng lượng cơ thể của người nhận. Với việc giảm liều tế bào gốc tạo máu xuống còn 1 x 10 7 và ít tế bào nhân lên trên 1 kg trọng lượng cơ thể, nguy cơ bị ghép mạch và tái phát ung thư tăng mạnh. Cần phải thừa nhận rằng số lượng tối thiểu các tế bào tiền thân yêu cầu phục hồi nhanh hemopoiesis sau khi tổng hợp GSG vẫn chưa được biết đến. Về mặt lý thuyết này có thể đạt được bằng cách sử dụng tế bào duy nhất, nhưng trong lâm sàng xương cấy ghép tủy nhanh chóng và ổn định cấy ghép đảm bảo truyền ít nhất (1-3) × 10 8 tế bào có nhân mỗi 1 kg trọng lượng cơ thể bệnh nhân.

Một nghiên cứu chi tiết gần đây để xác định số lượng tối ưu của HSC trong huyết học học bao gồm việc quan sát bệnh nhân của ba nhóm bị cô lập phụ thuộc vào nội dung của tế bào CD34 dương tính trong vật liệu cấy ghép. Bệnh nhân nhóm đầu tiên nhận được (3-5) x 10 6 tế bào / kg. Liều HSC ở bệnh nhân ở nhóm thứ hai là (5-10) x 10 6 tế bào / kg, và bệnh nhân nhóm thứ ba được ghép tế bào CD34 + trên 10 x 10 6 tế bào / kg. Các kết quả tốt nhất được quan sát thấy ở nhóm người nhận được ghép với số tế bào CD34 dương tính bằng (3-5) x 10 6 / kg. Với sự gia tăng liều của các tế bào cấy hơn 5 × 10 6 / kg lợi thế đáng kể về mặt thống kê đã được xác định. HSCs nội dung do đó rất lớn trong việc cấy ghép (> 10 x 10 x 6 / kg) được liên kết với một số lượng đáng kể reinfusion còn lại của tế bào ung thư, dẫn đến tái phát của bệnh. Không có mối quan hệ trực tiếp giữa số lượng tế bào tiền thân allogen được cấy ghép và sự phát triển của phản ứng "nhân ghép với máy chủ".

Kinh nghiệm tích lũy thế giới của việc cấy ghép máu HSC khẳng định tiềm năng hồi phục cao của họ. Tỉ lệ ghép của ghép tủy là tương quan với số lượng tế bào nhân tạo được giới thiệu. Kết quả tốt nhất được quan sát thấy khi cấy ghép 3 × 10 7 / kg, trong khi ở tủy xương liều này là 2 x 10 8 / kg. Theo số liệu của các trung tâm điều phối, vào cuối năm 2000, 1200 ca cấy ghép tế bào máu rốn được sản xuất trên thế giới, chủ yếu từ các thân nhân hiến (83%). Rõ ràng, máu dây rốn nên được xem như là một thay thế cho tủy xương để cấy ghép cho bệnh nhân mắc bệnh hemoblastoses.

Tuy nhiên, trẻ sơ sinh chất Cordova nguồn gốc của mô tạo máu khuyến khích do sự hiện diện của tính năng chức năng của GCW của nó. Tuy nhiên, chỉ có kinh nghiệm lâm sàng có thể đưa ra một câu trả lời cho câu hỏi của sự phù hợp của một mẫu máu dây rốn cho pha máu trưởng thành của người nhận với bất sản của tạo máu. Ghép tế bào máu dây được sử dụng trong điều trị nhiều loại bệnh của khối u và phi u thiên nhiên: bệnh bạch cầu và hội chứng myelodysplastic, non-Hodgkin lymphoma, và nguyên bào thần kinh, thiếu máu bất sản, thiếu máu Fanconi bẩm sinh và quạt Diamond Black, thiếu độ kết dính bạch cầu, hội chứng Barr, hội chứng Gunther bệnh Harlera, thalassemia .

Sự chú ý và nghiên cứu riêng biệt đáng được hưởng các khía cạnh miễn dịch của việc cấy ghép các tế bào tạo máu trong máu rốn. Người ta thấy rằng trong trường hợp ghép tế bào gốc máu dây từ các nhà tài trợ với kết quả ghép HLA kết hợp đầy đủ được khá khả quan, mà, theo các tác giả, cho thấy máu dây immunoreactivity thấp hơn so với tủy xương.

Một nghiên cứu chi tiết về các thành phần tế bào máu dây rốn cho thấy tính năng của cả quang phổ kiểu hình của các tế bào effector của hệ thống miễn dịch và hoạt động chức năng của họ, cho phép xem xét máu dây như một nguồn HSCs với nguy cơ tương đối thấp của phản ứng "ghép so với host". Trong số các dấu hiệu của sự non nớt về chức năng của các tế bào máu rốn có chức năng miễn dịch, cần lưu ý đến sự mất cân bằng trong sản xuất cytokine và giảm độ nhạy cảm đối với sự điều tiết cytokine của phản ứng miễn dịch. Hậu quả là sự ức chế hoạt động của tế bào lymphô tế bào được coi là một yếu tố góp phần tạo ra sự miễn dịch về miễn dịch đối với mô hemopoietic được cấy ghép. Trong một quần thể tế bào lympho máu tủy, như trái ngược với máu và xương tủy ngoại vi từ các nhà tài trợ lớn, thống trị, các tế bào chưa trưởng thành không hoạt động và các tế bào ức chế. Điều này cho thấy số lượng tế bào lympho T trong máu giảm xuống đáp ứng miễn dịch. Một đặc điểm quan trọng của dân số monocyte của các tế bào máu rốn là hàm lượng thấp các tế bào biểu hiện kháng nguyên đầy đủ chức năng và hoạt động.

Một mặt, một mức độ thấp của sự trưởng thành của các tế bào effector của hệ thống miễn dịch trong huyết tủy kéo dài đến việc sử dụng nó trong các phòng khám, do những tính năng cho phép giảm cường độ của cuộc xung đột giữa các tế bào miễn dịch của nhà tài trợ và người nhận. Nhưng, mặt khác, chúng ta biết về sự tồn tại của một mối tương quan giữa mức độ phản ứng "ghép so với bệnh host" và ghép hiệu quả chống ung thư, ví dụ, ảnh hưởng của sự phát triển của "ghép-versus-bệnh bạch cầu". Kết hợp với điều này, một nghiên cứu đã được tiến hành về tính gây độc tế bào hồng cầu của các tế bào máu rốn. Kết quả cho thấy, bất chấp sự phản ứng miễn dịch thực sự suy yếu của các tế bào máu dây để kích thích kháng nguyên, kích hoạt ở nơi đầu tiên là các tế bào sát thủ tự nhiên và các tế bào killeropodobnymi rằng đang tích cực tham gia vào các cơ chế của việc thực hiện gây độc tế bào chống khối u. Hơn nữa, trong nhóm quần thể tế bào lympho máu dây được tìm thấy với kiểu hình CD16 + CD56 + và CD16 "TCRa / p +. Người ta cho rằng các tế bào này trong một hình thức kích hoạt thực hiện phản ứng" ghép-versus-bệnh bạch cầu".

Tại Viện Ung thư học, Viện Khoa học Y tế của Ukraine tế bào tạo máu trữ lạnh từ máu dây rốn đã được dùng cho bệnh nhân ung thư với hypoplasia dai dẳng của tạo máu do hóa trị và xạ trị. Ở những bệnh nhân, ghép tế bào gốc tạo máu của máu dây một cách hiệu quả phục hồi sự đàn áp huyết, bằng chứng là cao dai dẳng của các yếu tố hình thành trưởng thành trong máu ngoại vi, cũng như sự gia tăng các chỉ số đặc trưng cho tình trạng miễn dịch tế bào và dịch thể. Tính ổn định của hiệu ứng tái tạo sau khi cấy ghép các tế bào tạo máu trong máu rốn cho phép tiếp tục bức xạ và hóa trị mà không làm gián đoạn quá trình điều trị. Có bằng chứng về hiệu quả cao hơn cấy ghép bệnh nhân ung thư máu tủy tế bào gốc: tỉ lệ hàng năm tái phát của khối u trong việc sử dụng chúng là 25% so với 40% ở những bệnh nhân với một gen dị ghép tủy xương cấy.

Cơ chế hoạt động của tế bào gốc máu dây trữ lạnh nên được coi là kết quả của một sự kích thích miễn dịch dịch thể của người nhận tạo máu do khả năng duy nhất của các tế bào sơ sinh để autocrine sản xuất yếu tố tăng trưởng tạo máu, cũng như một hệ quả của cấy ghép tạm thời của các tế bào của nhà tài trợ (như là một xác nhận - một sự gia tăng đáng kể trong nội dung của máu ngoại vi hemoglobin bào thai nhận 7-15 ngày thứ sau khi truyền so với ban đầu). Vắng mặt trong những người nhận máu tủy phản ứng sau truyền - kết quả của sự khoan dung tương đối của các tế bào miễn dịch, cũng như các tiêu chí tự tin hữu ích của vật liệu sinh học trữ lạnh.

Tế bào tiền thân tế bào lympho T killer dây máu có khả năng kích hoạt dưới ảnh hưởng của kích thích cytokine ngoại sinh được sử dụng để phát triển các phương pháp in vivo mới ex vivo và dụ dỗ các tế bào gây độc tế bào lymphoid chống khối u cho liệu pháp miễn dịch ghép sau này. Bên cạnh đó, "non nớt" của bộ gen của tế bào miễn dịch trong máu rốn cho phép việc sử dụng chúng để tăng cường hoạt động chống ung thư bằng cách xây dựng mô hình phân tử.

Ngày nay, máu dây rốn đã tìm thấy ứng dụng rộng rãi chủ yếu trong huyết học nhi khoa. Ở trẻ em với allotransplantation bệnh bạch cầu cấp tính của các tế bào gốc tạo máu của máu dây so với cấy ghép tủy xương, làm giảm đáng kể tỷ lệ phản ứng "ghép so với host". Tuy nhiên, có một giai đoạn giảm bạch cầu trung tính và giảm tiểu cầu, và, đáng tiếc, một tỷ lệ tử vong sau khi cấy ghép cao hơn 100 ngày. Một thời gian dài phục hồi trong bạch cầu hạt trong máu ngoại vi và tiểu cầu có thể là do thiếu sự khác biệt của subpopulations cá nhân của CD34 tế bào tích cực của máu dây rốn, bằng chứng là ở mức độ thấp của sự hấp thụ của rhodamine phóng xạ và biểu hiện thấp của kháng nguyên CD38 trên bề mặt của chúng.

Đồng thời, việc cấy ghép tế bào gốc tạo máu của máu rốn của bệnh nhân trưởng thành, thực hiện do thiếu cả một người hiến tặng tủy xương không liên quan phù hợp, cũng như cơ hội để huy động tự thân HSC cho thấy hàng năm tồn tại tái phát miễn phí cao ở những bệnh nhân ở độ tuổi dưới 30 năm (73%) . Sự mở rộng phạm vi tuổi của người nhận (18-46 năm) làm giảm tỷ lệ sống sót xuống còn 53%.

Phân tích định lượng của các tế bào với các kiểu hình CD34 + máu tủy xương và tủy cho thấy cao hơn (3,5 lần) nội dung của họ trong tủy xương, nhưng máu dây rốn cho thấy một ưu thế đáng kể của các tế bào với cấu hình kiểu hình của CD34 + HLA-DR .Izvestno, đánh dấu chtokletkikrovisimmunologicheskimi CD34 + HLA-DR sinh sôi nảy nở nhiều hơn tích cực hơn so với các tế bào với immunophenotype CD34 + HLA-DR +, như khẳng định trong nghiên cứu thực nghiệm của sự phát triển của nền văn hóa lâu dài của các tế bào tạo máu trong ống nghiệm. Bậc tiền bối tế bào nguyên thủy với kiểu hình CD34 + CD38 chứa trong máu dây rốn và tủy xương, nhưng rốn tế bào máu dây với điểm đánh dấu thiết CD34 + CD38 có hoạt động clonogenic cao hơn các tế bào tạo máu của kiểu hình giống nhau, cô lập từ tủy xương hiến trưởng thành. Bên cạnh đó, rốn tế bào máu dây với CD34 + CD38 immunophenotype sẽ sinh sôi nảy nở để đáp ứng với kích thích với các cytokine (IL-3, IL-6, G-CSF) và tái sản xuất hơn 7 lần thuộc địa trong các nền văn hóa lâu dài hơn so với các tế bào tủy xương.

Các ngân hàng của tế bào gốc máu dây rốn

Cho sự phát triển đúng đắn của các lĩnh vực mới của y học thực tế - cấy ghép tế bào gốc máu dây, cũng như để thực hiện ca cấy ghép tế bào gốc tủy xương tạo máu, bạn phải có một mạng lưới rộng lớn của các ngân hàng máu, mà đã được thành lập tại Mỹ và châu Âu. Các mạng lưới quốc gia của các ngân hàng máu dây rốn được thống nhất bởi Hiệp hội các Ngân hàng Netcord. Tính khả thi của việc thiết lập một hiệp hội quốc tế của các ngân hàng máu dây được xác định bởi thực tế là để thực hiện cấy không liên quan cần một số lượng lớn các mẫu máu dây rốn gõ, cho phép lựa chọn các nhà tài trợ HLA-giống hệt nhau. Chỉ việc thành lập một hệ thống ngân hàng lưu trữ các mẫu máu của các loại HLA khác nhau trong đó mới có thể giải quyết được vấn đề tìm kiếm người hiến tặng cần thiết. Việc tổ chức hệ thống ngân hàng dây rốn như vậy đòi hỏi sự phát triển ban đầu của các chuẩn mực đạo đức và pháp lý hiện đang được thảo luận ở cấp độ quốc tế.

Để tạo ngân hàng máu dây rốn ở Ukraine, cần phải đưa ra một số điều khoản và văn bản.

Trước hết, đây là những câu hỏi về chuẩn hóa các phương pháp lấy mẫu, phân đoạn và đóng băng máu rốn. Nó là cần thiết để điều chỉnh các quy tắc lấy máu dây rốn trong bệnh viện, phù hợp với các yêu cầu về đạo đức y tế, để xác định số tiền tối thiểu của máu dây rốn, cung cấp một cấy ghép thành công. Nó nên được so sánh và chuẩn hoá các tiêu chí khác nhau của việc đánh giá chất lượng và số lượng của các tế bào máu cũng như phương pháp HLA-đánh máy và phương pháp chẩn đoán bệnh di truyền và nhiễm trùng có thể được truyền qua các truyền của các tế bào máu dây rốn thiết lập tiêu chí lựa chọn chung các nhà tài trợ cho sức khỏe. Cũng nên thảo luận về việc tạo ra các cơ sở lưu trữ riêng biệt cho huyết thanh, tế bào và DNA lấy từ máu dây rốn.

Hoàn toàn cần thiết để tổ chức một mạng máy tính dữ liệu về máu dây rốn để thực hiện mối quan hệ với sổ đăng ký của các nhà tài trợ tủy xương. Để phát triển hơn nữa việc cấy ghép tế bào, nên phát triển các quy trình đặc biệt để so sánh kết quả của máu rủ và ghép tủy xương từ các thân nhân giống hệt HLA và các nhà tài trợ không liên quan. Trong việc đối phó với những vấn đề đạo đức và pháp lý của việc sử dụng lâm sàng của các tế bào máu dây có thể giúp chuẩn hóa tài liệu, trong đó có sự đồng ý thông báo của cha mẹ, cũng như thông báo của người mẹ hoặc người thân của đứa trẻ xác định bởi di truyền và / hoặc các bệnh truyền nhiễm.

Điều kiện xác định cho sự phát triển của cấy ghép tế bào ở Ukraine sẽ là việc thông qua Chương trình quốc gia vì sự quyên góp của các tế bào gốc và sự phát triển của hợp tác quốc tế với các nước khác thông qua Hiệp hội World of tủy xương hiến (WMDA), chương trình tủy xương hiến Quốc gia Hoa Kỳ (NMDP) và thanh ghi khác.

Khái quát lịch sử vẫn còn thiếu máu cấy ghép tế bào gốc máu dây rốn, chúng tôi lưu ý rằng giả định đầu tiên về khả năng ứng dụng lâm sàng của máu dây rốn, được làm vào đầu những năm 70, đã được khẳng định trong 80 năm kết quả nghiên cứu thực nghiệm ở động vật, và vào năm 1988 năm đã được tiến hành cấy ghép đầu tiên trên thế giới của các tế bào máu của máu dây rốn của con người, và sau đó bắt đầu phát triển một mạng lưới toàn cầu của các ngân hàng máu dây rốn. Sau 10 năm, số lượng bệnh nhân với các tế bào tạo máu cấy, rốn máu dây gần với 800. Trong số đó có những bệnh nhân bị các bệnh khác nhau khối u (bệnh bạch cầu, ung thư hạch, khối u rắn) và phi u (suy giảm miễn dịch bẩm sinh, thiếu máu, các bệnh liên quan đến rối loạn chuyển hóa) thiên nhiên.

Trong máu dây rốn, nội dung của các tế bào gốc sớm và cam kết cao hơn trong máu ngoại vi của người lớn. Với số lượng các đơn vị hình thành đại tràng và đại thực bào và tiềm năng tăng sinh của chúng, máu rốn đáng kể vượt quá máu ngoại vi của người lớn ngay cả sau khi đưa ra các yếu tố tăng trưởng. Trong nuôi cấy tế bào dài hạn trong ống nghiệm, đã có một hoạt động sinh sôi nẩy nở hơn và khả năng tồn tại của tế bào máu rốn cao hơn tế bào tủy xương. Những khoảnh khắc quan trọng trong việc cấy ghép tế bào gốc máu dây rốn là số lượng và có nhân tế bào tiềm năng tạo máu, sự hiện diện của nhiễm cytomegalovirus, các nhà tài trợ HLA-tương thích và người nhận, trọng lượng cơ thể và tuổi tác của bệnh nhân.

Tuy nhiên, việc cấy ghép tế bào gốc của máu dây rốn nên được xem như là một sự thay thế cho việc cấy ghép tủy xương để điều trị các bệnh về máu nghiêm trọng, đặc biệt ở trẻ em. Vấn đề lâm sàng của cấy ghép các tế bào máu dây rốn dần dần được giải quyết - có kỹ thuật lấy mẫu đã khá hiệu quả, tách và bảo quản lạnh của các tế bào máu dây, cung cấp các điều kiện cho sự hình thành của các ngân hàng máu dây, các phương pháp thử nghiệm được cải thiện tế bào có nhân. Tối ưu cho việc tách bạch với việc thu mua các tế bào gốc tạo máu của máu dây rốn quy mô lớn khi tạo ngân hàng nên được coi là dung dịch gelatin 3% và dung dịch hydroxyethyl tinh bột 6%.

Perehrestenko P. Et al (2001) một cách đúng đắn chỉ ra rằng việc cấy ghép tế bào gốc máu dây nên mất vị trí xứng đáng của nó trong các biện pháp điều trị phức tạp để khắc phục tình trạng trầm cảm của tạo máu có nguồn gốc khác nhau, như GSK dây máu khác nhau về một số lợi thế đáng kể, trong đó quan trọng là tương đối dễ dàng của thu hoạch, không gây nguy hiểm cho người hiến tặng, ô nhiễm trẻ sơ sinh nhiễm virut ở mức thấp và chi phí cấy ghép tương đối thấp. Một số tác giả cho rằng việc cấy ghép tế bào máu dây rốn ít thường xuyên hơn so với các tế bào tủy xương được đi kèm với các biến chứng liên quan đến phản ứng của "ghép so với máy chủ", mà là do, theo quan điểm của họ, một biểu hiện yếu trong các tế bào máu dây của kháng nguyên HLA-DR và họ chưa trưởng thành. Tuy nhiên, dân số chính của các tế bào có nhân máu dây rốn là T-lymphocyte (tế bào SDZ dương tính), có nội dung là khoảng 50%, đó là ít hơn trong máu ngoại vi của một người lớn 20%, nhưng sự khác biệt về kiểu hình của quần xã của tế bào T từ những các nguồn không đáng kể.

Trong số những yếu tố trực tiếp ảnh hưởng đến sự sống còn của cấy ghép tế bào gốc máu dây rốn, chúng ta nên lưu ý độ tuổi của bệnh nhân (kết quả tốt nhất được nhìn thấy trong những người nhận ở độ tuổi lên đến 5 năm), chẩn đoán sớm của bệnh và một dạng bệnh bạch cầu (hiệu quả là cao hơn đáng kể trong bệnh bạch cầu cấp tính). Tầm quan trọng lớn là liều của các tế bào máu rốn gắn liền, cũng như khả năng tương thích của HLA với người nhận. Nó không phân tích tai nạn về hiệu quả lâm sàng của cấy ghép máu dây GSK trong Oncology và Huyết học cho thấy kết quả điều trị tốt nhất bằng việc cấy liên quan: một năm sống không bệnh miễn phí trong trường hợp này đạt 63%, trong khi cấy ghép không liên quan - chỉ 29%.

Như vậy, sự hiện diện của một số lượng lớn các tế bào gốc trong máu dây rốn và tế bào gốc tạo máu ở trẻ sơ sinh khả năng repopulyatsionnaya cao làm cho họ thích hợp cho việc cấy ghép đồng loại ở những bệnh nhân với khối u ác tính huyết học. Tuy nhiên, lưu ý rằng các tóm tắt của tạo máu sau khi cấy ghép tế bào gốc tạo máu của máu dây "được kéo dài trong thời gian": khôi phục nội dung trong bạch cầu trung tính trong máu ngoại vi thường xảy ra vào cuối tuần thứ 6, và hiện tượng giảm tiểu cầu biến mất, thường sau 6 tháng. Bên cạnh đó, các tế bào tạo máu chưa trưởng thành của máu dây rốn không loại trừ xung đột miễn dịch: Tất nhiên nghiêm trọng của cấp tính và mãn tính phản ứng "ghép so với host" quan sát lần lượt trong 23 và 25% của người nhận. Tái phát của bệnh bạch cầu cấp tính vào cuối năm đầu tiên sau khi cấy tế bào máu dây rốn được tìm thấy trong 26% các trường hợp.

trusted-source[10], [11]

Translation Disclaimer: For the convenience of users of the iLive portal this article has been translated into the current language, but has not yet been verified by a native speaker who has the necessary qualifications for this. In this regard, we warn you that the translation of this article may be incorrect, may contain lexical, syntactic and grammatical errors.

You are reporting a typo in the following text:
Simply click the "Send typo report" button to complete the report. You can also include a comment.