Các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học trong chẩn đoán tổn thương tiền ung thư niêm mạc miệng và viền môi đỏ

Chẩn đoán kịp thời và hiệu quả các tổn thương tân sinh ở niêm mạc miệng (OM) và viền môi son (VBL) vẫn là một vấn đề nghiêm trọng trong ung thư học. Ung thư biểu mô tế bào vảy của khoang miệng đứng thứ sáu trên thế giới về tần suất trong số các khối u ác tính ở mọi vị trí. Tại Liên bang Nga, tỷ lệ mắc các khối u ác tính của khoang miệng là 2-4% tổng số khối u ác tính ở người.

Trong những năm gần đây, cấu trúc bệnh lý niêm mạc miệng đã có những thay đổi đáng kể, đặc biệt là tỷ lệ bệnh tiền ung thư tăng lên. Về vấn đề này, việc phát hiện hiệu quả không xâm lấn các dấu hiệu ác tính vẫn là nhiệm vụ cấp bách trong nha khoa.

Mặc dù có vẻ đơn giản khi quan sát lâm sàng những thay đổi có thể dự đoán ở niêm mạc miệng và CCG liên quan đến vị trí bên ngoài, nhưng việc định nghĩa dạng tiền ung thư theo bệnh học, chỉ dựa trên ấn tượng khi khám và sờ nắn, thường dẫn đến sai sót trong chẩn đoán, vì mức độ sừng hóa hoặc loét khác nhau của ngay cả các yếu tố đánh dấu của tổn thương khiến chúng khó phân biệt. Chẩn đoán sớm bệnh ác tính đặc biệt khó khăn, vì các dấu hiệu lâm sàng của bệnh xuất hiện muộn hơn một chút so với quá trình chuyển đổi ác tính thực sự.

Như vậy, các nghiên cứu của VP Kharchenko và cộng sự cho thấy hơn 2/3 số bệnh nhân mắc bệnh ở giai đoạn III-IV khi họ đi khám và được chẩn đoán. Một trong những lý do khiến việc điều trị muộn là do hình ảnh lâm sàng "mờ nhạt" ở giai đoạn đầu của bệnh. Ngoài ra, nhu cầu về công tác tổ chức và phương pháp luận cũng như nâng cao trình độ hiểu biết của bác sĩ nha khoa về các biểu hiện lâm sàng sớm của các bệnh tiền ung thư niêm mạc miệng đã được chứng minh. Các xét nghiệm cho thấy chỉ có 42,8% bác sĩ nha khoa phân biệt được các biểu hiện sớm của ung thư niêm mạc miệng, 4,2% số người được hỏi có thể thực hiện đúng các biện pháp chẩn đoán ban đầu để phát hiện ung thư ở vị trí này.

Tỷ lệ các dạng ung thư niêm mạc miệng không thể chữa khỏi do lỗi chẩn đoán, theo nhiều tác giả, lên tới 58,4-70%. Tình hình trở nên phức tạp hơn do các vấn đề chưa được giải quyết về chẩn đoán lâm sàng tiền ung thư, đặc biệt là những khó khăn trong việc phân biệt sự khởi phát của ác tính, cũng như vấn đề lựa chọn phương pháp điều trị bệnh tiền ung thư. Không có chỉ định tuyệt đối và tương đối nào cho sinh thiết, đặc biệt là ở các giai đoạn điều trị bảo tồn. Cho đến nay, không có một ví dụ nào trong tài liệu về tiêu chuẩn chẩn đoán ở cấp độ lâm sàng mà nha sĩ có thể tham khảo khi lựa chọn phương pháp điều trị phù hợp cho một bệnh tiền ung thư cụ thể.

Hầu hết các tác giả đều thấy việc giải quyết các khó khăn trong chẩn đoán bằng các phương pháp chẩn đoán phụ trợ (kiểm tra tế bào học, soi miệng, soi sinh học, chụp cắt lớp quang học). Tuy nhiên, các phương pháp này khá chủ quan vì chúng chỉ mô tả những thay đổi về mặt định tính ở các mô bị ảnh hưởng. Một trong những phương pháp đánh giá định lượng các thay đổi về mặt hình thái là xác định các dấu hiệu miễn dịch mô học.

Việc đưa các phương pháp hình thái học hiện đại để xác minh khối u vào thực hành hàng ngày đã cải thiện đáng kể chất lượng chẩn đoán và điều trị các khối u ác tính. Khả năng phương pháp luận của ung thư học phân tử hiện đại đã được mở rộng; hiện nay, bằng cách sử dụng nghiên cứu miễn dịch mô hóa học, có thể thiết lập không chỉ chẩn đoán mô học của khối u mà còn đưa ra các đặc điểm hình thái chức năng của nó về mức độ hung hãn và tiên lượng liên quan đến các tổn thương tiền ung thư và bệnh ung thư đã phát triển.

Theo các khái niệm hiện đại, sự chuyển đổi ác tính của tế bào dựa trên sự hoạt hóa của một hoặc nhiều oncogen tế bào hoặc gen ức chế. Nó được quan sát thấy ở 30% các bệnh ung thư ở người và trong nhiều trường hợp có thể được phát hiện bằng phương pháp miễn dịch mô hóa học. Oncogen ras p21, HER2/neu, bcl-2 và gen ức chế p53 và Rb đã được nghiên cứu trong nhiều khối u khác nhau. Một số oncogen được liệt kê (và gen ức chế) là các đặc điểm tiên lượng và dự đoán độc lập.

Biểu mô niêm mạc miệng là nơi hình thành khối u ung thư. Các yếu tố bên ngoài (nút tắc nghẽn do chấn thương, cạnh sắc của phục hình, cấu trúc chỉnh hình không hòa tan, vệ sinh răng miệng cá nhân không hợp lý, tổn thương nha chu viêm-phá hủy) cùng với các yếu tố di truyền (di truyền) có thể đóng vai trò quyết định trong sự xuất hiện của ung thư tại vị trí này. Tổn thương các cơ chế kiểm soát tăng sản biểu mô và quá trình chuyển sản tế bào vảy có thể liên quan đến sự phát triển của ung thư tế bào vảy niêm mạc miệng.

Các đặc điểm hình thái của biểu mô niêm mạc miệng trong quá trình ác tính có liên quan đến những thay đổi trong bộ dấu hiệu biệt hóa (chủ yếu là kiểu hình cytokeratin của lớp biểu mô), biểu hiện CEA cũng như các dấu hiệu tăng sinh Ki - 67.

P53 là một gen ức chế khối u có sản phẩm protein là một yếu tố phiên mã hạt nhân có nhiều chức năng, bao gồm ngăn chặn tế bào đi qua chu kỳ tế bào và gây ra apoptosis. Protein p53 được biểu hiện trong tất cả các tế bào của cơ thể. Khi không có tổn thương ở bộ máy di truyền, protein p53 không hoạt động và khi DNA bị tổn thương, nó sẽ được kích hoạt. Hoạt hóa bao gồm việc có được khả năng liên kết với DNA và kích hoạt phiên mã của các gen có chứa trình tự nucleotide trong vùng điều hòa, được chỉ định là yếu tố đáp ứng p53. Đột biến của p53, xảy ra trong các tế bào của khoảng 50% khối u ung thư, dẫn đến tổng hợp một loại protein mất chức năng, nhưng có độ ổn định cao và tích tụ trong nhân, được biểu hiện miễn dịch mô hóa học trong nhuộm nhân riêng biệt.

Kiểu "hoang dã" của gen ức chế khối u wt-53 và protein p53 mà nó mã hóa đóng vai trò trung tâm trong quá trình apoptosis. Khi DNA bị tổn thương, gen wt53 và protein tương ứng được biểu hiện. Protein sau sẽ chặn chu kỳ tế bào trong pha G1-S và do đó ức chế sự sao chép tiếp theo của DNA bị tổn thương, được tổng hợp trong pha S và tạo điều kiện để loại bỏ vị trí bị tổn thương và sửa chữa phần bị thay đổi của nó. Nếu quá trình sửa chữa xảy ra, tế bào tiếp tục phân chia và tạo ra các tế bào khỏe mạnh. Tuy nhiên, nếu quá trình sửa chữa không xảy ra, các cơ chế khác sẽ được kích hoạt để đảm bảo phá hủy một tế bào như vậy với DNA bị tổn thương (đột biến), tức là một chương trình di truyền về cái chết của tế bào, apoptosis, phát triển.
Các nghiên cứu gần đây đã chỉ ra rằng trạng thái p53 có thể là yếu tố quyết định độ nhạy cảm của khối u đối với liệu pháp hóa trị và xạ trị. Giả định này được hỗ trợ bởi nhiều nghiên cứu chứng minh rằng p53 đột biến là một yếu tố gây tiên lượng kém và không hiệu quả của liệu pháp bổ trợ cho nhiều khối u ở niêm mạc miệng.

Các dấu hiệu tăng sinh cũng có giá trị chẩn đoán thông tin cao trong việc dự đoán quá trình của khối u ác tính. Hoạt động tăng sinh là một yếu tố hàng đầu trong cả cơ chế chuyển đổi tế bào ác tính và trong hành vi sinh học của các khối u đã phát sinh. Một dấu hiệu đầy hứa hẹn của hoạt động tăng sinh là kháng nguyên Ki-67, được biểu hiện ở hầu hết các pha của chu kỳ tế bào và do đó phản ánh kích thước của nhóm tăng sinh. Gen mã hóa Ki-67 nằm trên cánh dài của nhiễm sắc thể 10. Ki-67 là một protein điều hòa. Sự xuất hiện của nó trùng với thời điểm tế bào đi vào nguyên phân, cho phép nó được sử dụng như một dấu hiệu tăng sinh phổ quát để đánh giá sự phát triển của khối u ác tính.

Một số nghiên cứu đã được tiến hành để kiểm tra giá trị chẩn đoán của các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học trong việc dự đoán tiến trình của các tổn thương tiền ung thư ở niêm mạc miệng và viền môi. Murti PR và cộng sự đã nghiên cứu biểu hiện p53 ở liken phẳng ở niêm mạc miệng. Xác định biểu hiện p53 bằng miễn dịch mô hóa học không phát hiện được tình trạng ác tính của tiền ung thư ở niêm mạc miệng. Các tác giả cho rằng đỉnh điểm của sự biểu hiện quá mức p53 gần với thời điểm chuyển đổi tiền ung thư thành ung thư và không thể được sử dụng làm dấu hiệu sớm để dự đoán tình trạng ác tính của tiền ung thư ở niêm mạc miệng. Các nhà nghiên cứu khác đã phát hiện ra rằng gen TP53 ở người mã hóa ít nhất 9 dạng khác nhau. Một thành viên khác của họ p53, p63, bao gồm 6 dạng khác nhau và đóng vai trò quan trọng trong sự phát triển của niêm mạc miệng, tuyến nước bọt, răng và da. Người ta cho rằng p63 có liên quan đến sự phát triển của ung thư biểu mô tế bào vảy ở đầu và cổ. Tuy nhiên, không phát hiện thấy những thay đổi có ý nghĩa thống kê trong biểu hiện của các đồng dạng p53 và p63 mới ở tiền ung thư niêm mạc miệng so với mô không thay đổi. Các nghiên cứu của De Sousa FA đã xác nhận ý nghĩa tiên lượng của dấu hiệu p53 trong việc xác định khả năng chuyển đổi ác tính của tiền ung thư niêm mạc miệng. Đồng thời, một số tác giả tin rằng p53 không thể được sử dụng làm dấu hiệu duy nhất để dự đoán sự phát triển của ung thư.

Không kém phần hứa hẹn về mặt tiên lượng là phát hiện miễn dịch mô hóa học của podoplanin trong các mẫu mô đang nghiên cứu - một mucoprotein màng tích phân được biểu hiện bởi cả nội mô không thay đổi và bị viêm và nội mô tân sinh của mao mạch bạch huyết. Các nhà nghiên cứu đã xác định được mối quan hệ có ý nghĩa thống kê giữa biểu hiện của podoplanin và ABCG2 (protein liên kết ATP, phân nhóm G2) với nguy cơ chuyển đổi ác tính của liken phẳng (nguy cơ cao hơn đáng kể khi biểu hiện đồng thời podoplanin và ABCG2 so với khi không biểu hiện đồng thời podoplanin và ABCG2) và kết luận rằng podoplanin và ABCG2 có thể được sử dụng làm dấu ấn sinh học để đánh giá nguy cơ chuyển đổi ác tính trong các tổn thương tiền ung thư của niêm mạc miệng.

Các nghiên cứu của các nhà khoa học nước ngoài đã xác nhận ý nghĩa chẩn đoán của biểu hiện Fas/FasL như là dấu ấn sinh học cho sự phát triển của ung thư niêm mạc miệng. Fas là glycoprotein xuyên màng loại I (đồng nghĩa với APO-I, CD95) và gây ra apoptosis trong tế bào sau khi tương tác với phối tử Fas (FasL) hoặc kháng thể đơn dòng chủ vận chống lại Fas.

Đồng thời, người ta biết rằng Fas được biểu hiện ở hầu hết mọi loại mô. Sự biểu hiện tăng lên của Fas được quan sát thấy ở thận, gan, tim và tuyến ức. Ngoài ra, thụ thể này được biểu hiện trên nhiều khối u, cũng như các tế bào bị nhiễm vi-rút. Lý do khiến nhiều loại tế bào kháng lại apoptosis phụ thuộc Fas có thể là do các tế bào này sản xuất nhiều Fas hòa tan hơn. Fas hòa tan là sản phẩm của quá trình ghép nối thay thế và có khả năng ức chế apoptosis gây ra bởi kháng thể đơn dòng chủ vận chống lại Fas hoặc FasL.

Như vậy, việc giải thích mơ hồ kết quả nghiên cứu của nhiều tác giả khác nhau cho phép chúng ta kết luận rằng ở giai đoạn phát triển hiện nay của ung thư học phân tử, việc sử dụng các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học kết hợp với các phương pháp chẩn đoán và tiên lượng khác về quá trình tổn thương tiền ung thư niêm mạc miệng có triển vọng.

Vấn đề xếp hạng các dấu hiệu miễn dịch mô học theo ý nghĩa chẩn đoán có liên quan đặc biệt. Chúng tôi tin rằng theo thứ tự giảm dần về ý nghĩa, chúng có thể được sắp xếp theo thứ tự sau:

1. Các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học có ý nghĩa chẩn đoán cao: podoplanin, ABCG2, bcl-2;
2. Các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học có ý nghĩa chẩn đoán trung bình: Bax, MMP-9;
3. Các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học đầy hứa hẹn, ý nghĩa chẩn đoán của chúng cần được nghiên cứu thêm: MMP-2, MT1-MMP, Fas/FasL;
4. Các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học có ý nghĩa chẩn đoán trong việc dự đoán quá trình của các bệnh tiền ung thư vẫn chưa được chứng minh: p53, p63.

Dựa trên phân tích dữ liệu văn học đã tiến hành, có thể kết luận rằng việc xác định các dấu hiệu miễn dịch mô học không nên được coi là phương pháp duy nhất để dự đoán tiến trình của các bệnh tiền ung thư niêm mạc miệng và xác định mức độ nguy cơ chuyển dạng ác tính, nhưng tuy nhiên, phương pháp này có giá trị chẩn đoán cao khi kết hợp với các phương pháp khác để dự đoán tiến trình của các bệnh tiền ung thư.

Nhà nghiên cứu cao cấp Kuznetsova Roza Gilevna. Các dấu hiệu miễn dịch mô hóa học trong chẩn đoán các tổn thương tiền ung thư của niêm mạc miệng và viền đỏ của môi // Y học thực hành. 8 (64) Tháng 12 năm 2012 / Tập 1

[ 1 ], [ 2 ], [ 3 ], [ 4 ], [ 5 ]